【摘 要】
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目的:探讨人胎膜体外孵育的方法和感染引发早产的可能机制及N-乙酰半胱氨酸(NAC)预防感染引发早产的可行性,为进一步研究胎膜的结构和功能,以及探讨预防和治疗早产的药物提供
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目的:探讨人胎膜体外孵育的方法和感染引发早产的可能机制及N-乙酰半胱氨酸(NAC)预防感染引发早产的可行性,为进一步研究胎膜的结构和功能,以及探讨预防和治疗早产的药物提供一定的理论依据。方法:取20例单胎足月择期剖宫产孕妇(无妊娠合并症、并发症,也无临产征兆,剖宫产指征为巨大儿臀位、头盆不称、疤痕子宫及社会因素)的胎膜在体外进行孵育,共72小时,孵育48小时后,一部分胎膜给予细菌内毒素脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)干预24小时。分成五组:0小时组(取下后未经孵育的胎膜),24小时组,48小时组,72小时LPS组,72小时LPS+NAC组。孵育结束后,首先评价各组体外孵育胎膜的存活力,然后应用免疫组织化学和逆转录多聚酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction ,RT-PCR)分别测定五组胎膜的基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的蛋白和转录水平表达变化,最后比较LPS组和LPS+NAC组MMP-9/TIMP-1比值的变化。结果:1、①孵育中的胎膜肉眼及光学显微镜观察:各组孵育的胎膜组织生长良好,新鲜如初,换液时各培养孔中的培养液均由樱桃红色变成淡橙色,偶见部分胎膜组织边缘有少量细胞生长。②苏木精-伊红(HE)染色观察:各组细胞的形态良好,胞膜完整,无皱缩,胞核无碎裂。③各组体外孵育胎膜的存活力:24小时组、48小时组、72小时LPS组、72小时LPS+NAC组分别为87%±1.9%,85%±1.3%,83%±1.6%,82%±1.2%,两两比较无显著性差异(P﹥0.05)。2、MMP-9在蛋白和转录水平的表达:0小时和48小时组的表达微弱,24小时组的表达较前两组增强(P﹤0.05),72小时LPS组的表达最强,72小时LPS+NAC组较LPS组的表达下降(P﹤0.05),各组TIMP-1的表达无显著性差异(P﹥0.05), LPS+NAC组较LPS组MMP-9/TIMP-1比值明显降低(P﹤0.05)。结论:绝对或相对MMP-9的活性升高可能是感染引发早产的机制之一,NAC有望在预防和治疗早产中发挥作用。
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