木瓜属栽培品种的分类研究

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木瓜属(Chaenomeles Lindley)隶属蔷薇科(Rosaceae)苹果亚科(Maloideae),约有4个原生种。除日本木瓜(C. japonica (Thunb.) Lindley ex Spach.)特产日本外,皱皮木瓜(C. speciosa (Sweet) Nakai)、毛叶木瓜(C. cathayensis (Hemsl.) Schneider)和西藏木瓜(C. thibetica Yü)主要分布于我国西南部和中东部。本属植物早春花繁色艳,秋天果实芳香,是重要的观赏花木、药材和果品,世界各地广泛栽培。木瓜属植物表型具有很强的可塑性,种间杂交容易,虽然对园艺利用有很高的价值,但对种质资源的鉴别和分类带来很大麻烦。随着新品种的培育和变异类型的调查发现,出现同物异名、同名异物,品种种源和品种间的亲缘关系模糊不清,缺乏完善的品种分类系统等一系列问题,亟待对木瓜属植物品种进行进一步的分类研究。在木瓜属品种资源调查的基础上,选用41个形态学性状对29个栽培品种和2个野生种进行了数量分类学的聚类分析。聚类结果显示,木瓜属品种资源可按品种的来源划分为毛叶木瓜种系、西藏木瓜、皱皮木瓜种系和日本木瓜种系4个表征群。日本木瓜种系较为独立,与毛叶木瓜种系的亲缘关系最远;西藏木瓜与毛叶木瓜的亲缘关系密切;皱皮木瓜种系位于日本木瓜种系和毛叶木瓜种系之间,与C.×superba和C.×vilmoriniana聚在一起。主成分分析表明,41个性状可综合为6个主成分,其累积贡献率达72.396%。综合聚类分析和主成分分析的结果结合实际应用,作者认为木瓜属栽培品种的分类体系首先应以种系(品种来源)为第一级标准,花的大小可作为品种分类的二级标准,花色作第三级分类标准。采用简化的SDS方法从木瓜属植物干燥的幼叶中提取总DNA,并对影响SRAP扩增反应的Mg2+浓度和DNA浓度等反应参数进行优化。优化得到结果稳定、重复性好的SRAP反应体系(25μL):1×PCR Buffer,2.0mmol·L-1 Mg2+,0.2 mmol·L-1 dNTPs,1.0 U Taq酶,10 pmol(各)引物,50 ng模板DNA。本研究建立的反应体系适合木瓜属植物的SRAP研究,为从分子水平鉴定种质资源和构建遗传图谱奠定基础。利用22个SRAP(sequence-related amplified polymorphism)引物组合对27份栽培品种和5份野生种进行聚类分析、主坐标分析及遗传多样性的评价。总共检测到152个多态性位点,平均每个引物组合6.91个的多态性位点,多态性位点百分数为73.08%。聚类分析显示,32份材料可划分为毛叶木瓜种系、西藏木瓜、皱皮木瓜种系、日本木瓜种系4个类群。西藏木瓜与毛叶木瓜种系聚为一支,亲缘关系密切;日本木瓜种系和皱皮木瓜种系聚为另一支,日本木瓜种系与毛叶木瓜种系亲缘关系最远,皱皮木瓜种系位于日本木瓜种系与毛叶木瓜种系之间。遗传多样性分析显示,日本木瓜种系和皱皮木瓜的遗传多样性指数高于毛叶木瓜种系,可能与交配、繁殖方式有关。属的水平上,种系间的遗传分化系数GST=0.4969。SRAP分子标记是研究木瓜属栽培品种遗传关系的有效工具。结合形态特征和SRAP分析结果,花柱基部被毛的状态是鉴定木瓜属栽培品种种源的准确指标之一。C.×superba是非独立的分类群,可作为皱皮木瓜种下的品种群。
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