目的通过构建异位皮下移植瘤裸鼠肿瘤模型,采用来自合作实验室设计并合成的包载DTX和NS-siRNA的共载药胶束验证该共载药胶束给药系统在体内是否也具有抑制前列腺癌发展的作用,并研究其在体内的药效学作用及对机体的毒副作用。方法1.裸鼠异位皮下移植瘤模型的建立:常规培养C4-2细胞,维持细胞处于对数生长期,调节活细胞浓度,使每只裸鼠分别接种2×10~6细胞,溶于150μL PBS和50μL基质胶,将肿瘤细胞注射于裸鼠腋窝皮下,1周后检查裸鼠是否成瘤。2.尾静脉注射给药研究其对裸鼠肿瘤的影响:将荷瘤成功的裸鼠随机分为6组(n=3):生理盐水组和治疗组:空胶束组、单载DTX组、单载NS-siRNA组、非靶向共载药组、靶向共载药组。参照相关资料文献以及多西他赛的用量确定给药量为DTX:10mg/kg,NS-siRNA:1mg/kg,通过尾静脉每隔4天连续5次注射给药,通过测量肿瘤体积(V)的变化以及裸鼠体重变化情况观察连续给药后各组裸鼠生长及其肿瘤增长情况是否有差异,并对结果行统计学分析。3.共载药胶束的体内药效学研究:通过将Cy5.5标记共载药胶束,利用动物活体成像系统观察共载药胶束靶向肿瘤组织的能力;通过肿瘤组织破碎提取RNA和总蛋白,结合qPCR和Western blot从蛋白表达水平研究共载药胶束抑制NS基因表达的能力,并对其结果进行统计学分析。4.共载药胶束的体内毒性研究:符合医学伦理常规处死裸鼠后,获取心、肝、脾、肾、肺等重要脏器,通过HE染色观察不同处理组的毒性作用。结果1.通过测定肿瘤体积(V)、质量及裸鼠体重的的变化,以生理盐水组和空胶束组作为对照,治疗组肿瘤的增长和裸鼠体重的增长不同程度受到影响,其中治疗组中靶向共载药组较其他3组肿瘤生长受抑更明显,同时裸鼠体重(kg)下降亦有相同趋势。2.通过荧光探针标记载药胶束,利用动物活体成像实验观察显示在肿瘤部位,具有靶向功能的共载药胶束的聚集信号值较不具有靶向功能的共载药胶束高。3.通过免疫组化、qPCR、以及Western blot检测发现,以生理盐水组和空胶束组作为对照,除单载DTX组中NS表达无差异外,其他治疗组肿瘤组织中NS的表达显著降低,靶向共载药组较其他治疗组表达更低,非靶向共载药组和单载NS-siRNA组几乎无差别.4.通过石蜡包埋切片做HE染色结果显示,以生理盐水组作为参照,空胶束组和治疗组裸鼠的心、肝、脾、肺、肾的组织结构并无明显改变。结论1.在体内此种载药胶束携带DTX和NS-siRNA可以抑制去势抵抗性前列腺癌裸鼠皮下移植瘤的增长从而发挥其抗肿瘤效果,抑制体内肿瘤的生长。2.具有前列腺细胞膜抗原(PSMA)靶向功能的携带NS-siRNA的共载药胶束在裸鼠体内可以发挥更好的抑制肿瘤生长的能力。3.此种共载药聚合物胶束在裸鼠体内的毒副作用较小,因此该共载药胶束或许安全性较高,具有应用于临床治疗去势抵抗性前列腺癌价值。