睾丸内注射法生产转基因猪的研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangmu2003
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精子载体法介导基因转移是以精子为载体,在受精时将外源基因导入胚胎中制备转基因动物的简单高效的方法之一。本研究主要采用睾丸内注射pCMMPD-GFP-HRDS1/2(S)定点打靶质粒试图获得转MPD基因猪,同时利用精子体外与外源DNA共孵育的方法,并把用两种转基因方法取得的实验结果进行了比较。 试验中共获得8头转基因猪,其中使用睾丸内注射法得到6头,转移效率5.36%,通过精子体外孵育法得到2头,转移效率5.41%,试验结论如下: 1、睾丸内注射法是一种有效的精子介导外源基因转移方法,质粒pCMMPD-GFP-HRDS1/2(S)被成功的导入精子,试验公猪在注射后60天仍可在精液中检测到外源DNA。通过人工授精得到F0代仔猪112头,其中5头携带外源基因。 2、睾丸内注射法和精子体外孵育法都可以将外源DNA导入精子并通过受精生产出携带外源DNA的仔猪,且效率相近。 3、曲细精管网是睾丸内注射的最佳部位。
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