乳糖酸/植物甾醇/海藻酸钠自组装纳米粒及抗肿瘤药物的靶向输送

来源 :安徽师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengpeng19860223
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本研究通过化学合成制备出一种新型的肝靶向两亲性纳米药物载体。首先,将作为疏水基的植物甾醇和亲水基的海藻酸钠进行酯化反应,得到植物甾醇-海草酸钠(PA)聚合物,然后将一种在肝癌细胞表面过度表达受体的配体乳糖酸接枝到PA聚合物上,获得乳糖酸-植物甾醇-海藻酸钠(LPA)聚合物,通过化学方法对其构造进行分析。基于两亲性聚合物在自主装的原理,获得空白LPA纳米载体。通过透射电子显微镜的图片得到其形态近似是圆球形,其平均粒径大约100nm左右,其临界聚集浓度为37mg/mL。将广谱抗肿瘤药物阿霉素(DOX)通过物理膜透析法被包载于LPA空白纳米药物载体中,测得最高包封率和载药量分别为95%和3.2%,同时发现随着DOX投入量的增加,载药量增加但包封率有所下降。在pH值为5.5、6.5、7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)测试了DOX的体外释放行为,结果表明,在PBS中随着pH值增加DOX释放也随之减慢。探究血液相容性证说明出DOX/LPA具有更好的生物安全性。细胞毒性采用CCK-8实验考察了游离DOX、空白纳米粒、DOX/PA纳米粒以及DOX/LPA纳米粒对 HepG2细胞的抑制其生长的作用,结果发现,没有包载DOX的空白纳米粒对 HepG2细胞基本没有表现毒性,但是游离DOX,随着浓度的增加,细胞的存活率大约从70%降低到15%左右,但是包载DOX的纳米粒尤其是连有乳糖酸分子的纳米粒的细胞存活率从43%作用下降到10%,说明DOX/LPA纳米粒具有明显的毒性作用。在去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)过度表达的肝癌细胞(HepG2细胞)的吞噬试验中,游离乳糖酸可以竞争性抑制连DOX/LPA纳米载体。在激光共聚焦显微镜下观察到DOX进入HepG2细胞的方式是不同的,游离阿霉素是通过被动扩散,而偶联乳糖酸的纳米粒的摄入是内吞实现的。由此得到,乳糖酸-植物甾醇-海藻酸钠载药纳米粒(DOX/LPA)可以靶向给药ASGPR过多表达的肝癌细胞,对正常细胞几乎没有毒性,是一种应用前景较为广阔的抗肝癌药物载体。
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