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应激(stress)是指机体在受到各种内外环境因素刺激时所作出的特异和(或)非特异性反应。机体遭受各种严重的创伤应激(外伤、灼伤等)后,常出现恶心、呕吐、腹痛,甚至消化道出血等胃肠道症状,这些症状的出现常与创伤应激后胃肠道功能紊乱有关。军事应激导致的损伤是部队非战斗减员的主要原因之一,其中应激性胃肠病是常见的症状。疼痛是战争创伤引起的常见症状,特别是慢性疼痛,也是近年来影响人们身心健康的主要因素之一,但其对消化系统功能的影响仍没有系统的研究。
Annexin 5 作为一种Ca2+依赖的磷脂酰丝氨酸结合蛋白,在组织中有广泛的分布,且 annexin 5 具有抗炎和抗凝血作用,能抑制PKC的活性,annexin 5 也参与了机体对应激的反应。鉴于annexin 5在抗炎等方面的重要作用,本研究通过模拟战争创伤建立两种疼痛模型:即福尔马林注射诱导的急性疼痛模型和坐骨神经选择性损伤诱导的慢性疼痛模型,研究急慢性疼痛应激状态下SD 大鼠胃及颌下腺显微结构变化及其对annexin 5 表达的影响,为研究应激引起的消化功能紊乱的机制提供新的思路。研究结果如下:
⑴急性疼痛应激状态下,实验组大鼠胃黏膜及颌下腺的结构没有明显的异常改变。福尔马林注射后1 h 胃及颌下腺中annexin 5的蛋白水平与对照组相比没有显著差异(P>0.05),而6 h 后annexin 5 蛋白水平都显著高于对照组(P<0.01)。高水平的annexin 5在胃中一直持续到24 h,至72 h 恢复到正常水平。而在颌下腺中,24 h 后annexin 5 即降至正常水平,但至72 h 又显著升高(P<0.01)。在mRNA 水平上,福尔马林注射后1 h 胃及颌下腺中annexin 5 都显著高于对照组(P<0.01)。胃中高水平的annexin 5 mRNA 至6 h 恢复到正常水平,而在颌下腺中一直持续到24 h,至72 h 恢复到正常水平。
⑵慢性疼痛应激状态下,手术组及假手术组大鼠颌下腺的结构没有明显的异常改变,而21 d 手术组大鼠胃黏膜上皮有变性、脱落现象,至28 d基本恢复正常。坐骨神经选择性损伤14 d 后,手术组大鼠胃及颌下腺中annexin 5的蛋白水平与对照组相比都显著下降(P<0.01),21 d 后手术组大鼠颌下腺中annexin 5蛋白水平与对照组及假手术组相比没有显著差异(P>0.05),而胃中annexin 5仍显著低于对照组及假手术组(P<0.05),至28 d 恢复到正常水平。在mRNA水平上,手术后14 d 大鼠胃中annexin 5 mRNA 水平显著下降(P<0.01),21 d有所恢复且至28 d 完全恢复到正常水平(P>0.05)。
结论:本研究从分子水平上揭示SD 大鼠胃及颌下腺中的annexin 5在急慢性疼痛应激反应过程中表达变化显著,annexin 5 可能是应激引起消化系统功能紊乱过程中的关键分子,但annexin 5在胃及颌下腺中的功能可能有所不同。福尔马林致炎引起的急性疼痛和坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛对annexin 5表达模式影响的差异可能是由于应激时间的长短及伤害性疼痛的机制不同所造成的。