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本文对常见水溶性荧光增白剂(FWA)CBS-X、VBL及BBU的光谱性质、定量分析方法及与生物分子的相互作用进行了研究。全文分为三章:
第一章对荧光增白剂的作用原理、通性、分类方法和毒理学性质;环境毒理学和分子毒理学的基本概念及研究进展;荧光增白剂定量分析和毒性分析的主要研究方法进行了综述。对荧光增白剂造成的环境问题进行了分析。
第二章分为两部分。第一部分研究了FWA的光谱性质。结果表明,在不同溶剂中,FWA的紫外-可见吸收光谱,荧光光谱,荧光量子产率等性质均符合Lippert方程和经典光谱学理论。在不同pH值的水溶液中,其荧光强度均在pH为4左右,即净电荷为零时达到最小值。在不同溶剂中的光漂白动力学曲线显示,CBS-X由于空间位阻大,具有很高的光稳定性;而VBL和BBU由于具有不稳定的二苯乙烯结构,容易发生顺反异构变化。
第二部分研究了FWA的定量分析方法。在2×10-4mol/L的十六烷基三甲基溴化铵溶液中,CBS-X的荧光强度明显增加,而VBL和BBU荧光强度几乎不变;在弱酸性乙醇溶液中,VBL和BBU的荧光强度明显增加,而CBS-X的荧光强度不受影响;结合由Surfer软件叠加而成的三维同步荧光光谱,确定了CBS-X、VBL、BBU的最佳同步荧光扫描波长差分别为78nm、92nm、136nm;由此实现了混合物中三种荧光增白剂的同时测定。对CBS-X:检出限0.078ng/mL,线性范围2.47×10-10-9.73×10-8mol/L,回收率93.3-101.6%;对VBL:检出限29.51ng/mL,线性范围0-1.58×10-6mol/L,回收率92.7-102.0%;对BBU:检出限20.28ng/mL,线性范围0-1.04×10-6mol/L,回收率95.2-102.6%。
第三章同样分为两部分。第一部分应用荧光共振能量转移法和同步荧光法,研究了FWAs与牛血清白蛋白(BSA)和核黄素(RF)的相互作用。结果表明,FWAs与BSA和RF均有较大程度的能量转移现象发生。由此测定了FWAs与生物分子相互作用的猝灭方式,猝灭常数,结合常数,结合位点数,结合距离,热力学常数和结合类型。FWAs与生物分子间主要发生静态猝灭,除CBS-X主要以氢键和范德华力与RF分子结合外,其余供体均以静电力与受体相结合。
第二部分应用上述数据及文献已有的基础数据,分析了FWAs的吸收特性、分子毒性、细胞毒性和致病性。结果表明,FWAs难以通过自由扩散进入细胞内,且在体内水解困难,仅以疏水作用破坏细胞膜蛋白,从而破坏细胞结构。其中VBL和BBU由于含多个芳香仲胺结构,具有潜在致癌作用。
本文提出的检测方法速度快,样品处理简便,选择性好,灵敏度高,具有实用价值。同时,本实验测得的基础数据,也可为更深层次的理论研究提供参考。