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目的观察靶向survivin的不同siRNA对EJ-28细胞增殖和凋亡的影响。方法通过化学合成方法合成3对siRNA和1对荧光标记的阴性对照siRNA。脂质体RNAi-MATE转染荧光标记的siRNA后,在荧光显微镜下观察转染效率。转染24h、48h和72h后,MTT法检测siRNA对EJ-28细胞增殖的影响;Annexin V-FITC流式细胞(Flow Cytometry,FCM)检测EJ-28细胞的凋亡率。转染最有效的siRNA至EJ-28细胞,48h后用,采透射电镜观察细胞超微结构;FCM检测细胞周期;免疫荧光检测转染后EJ-28细胞survivin基因表达的变化。结果1.当siRNA和RNAi-MATE的重量比为1:3时,转染效率最高为(59.15±1.44)%;靶向survivin的序列特异性siRNA均能抑制EJ-28细胞的增殖,与siRNA167、siRNA389相比,siRNA164抑制细胞增殖最强( P < 0.05) ,转染48h后的抑制率最高(41.32±2.54)%;转染48h后,siRNA164组诱导EJ-28细胞的凋亡率最高(13.23±0.25)%。2.在透射电镜下观察到转染后的EJ-28细胞典型的凋亡形态改变,如细胞缩小,核染色质浓染、边集,并可见凋亡小体。3.与对照组相比,转染siRNA164的EJ-28细胞的细胞周期主要停留在G2/M期,差异明显( P < 0.05)。4. siRNA组平均荧光强度值( 31.04±0.95 )低于对照组(55.01±1.27),即survivin基因表达水平低于对照组( P < 0.05),抑制率为(43.58±1.05)%。结论1.通过RNAi技术阻断survivin基因的表达,能抑制EJ-28细胞的增殖和促进其凋亡,siRNA164效果最好。2.靶向survivin的siRNA可能是通过阻断细胞周期,从蛋白水平抑制survivin的表达而抑制EJ-28细胞增殖。3.靶向survivin的RNAi技术在膀胱癌的基因治疗中可能具有一定的价值。