显齿蛇葡萄提取物与主要黄酮类化合物及衍生物的抗菌抗氧化活性研究

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本文选取17种二氢杨梅素含量不同的显齿蛇葡萄与显齿蛇葡萄中主要的9种单体黄酮类化合物以及显齿蛇葡萄提取物、二氢杨梅素和杨梅素的乙酰化、甲基化产物为研究对象研究了它们的抗菌抗氧化能力。采用乙醇超声辅助法获得显齿蛇葡萄提取物;采用药敏滤纸片法研究了所选样品的抗菌活性,并与二氢杨梅素纯品抑菌能力进行比较。采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系、邻二氮菲-Fe2+/H2O2体系产生羟自由基(·OH)和连苯三酚法在碱性溶液中自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-·)体系分别研究所选样品清除DPPH自由基、·OH自由基、O2-·自由基能力,并与Vc的抗氧化活性比较。实验研究结果归纳如下:1.17种显齿蛇葡萄提取物的抗菌抗氧化结果:17种提取物的抗菌抗氧化活性随提取物中二氢杨梅素含量的增加而增强,且提取物的抗菌活性和清除三种自由基能力显著强于相应含量二氢杨梅素纯品。在等浓度下,对五种细菌均有部分提取物的抑菌活性强于二氢杨梅素纯品;对DPPH·清除能力:二氢杨梅素大于所有样品,样品9~17大于Vc,样品2~17大于BHT;对·OH自由基清除作用:杨梅素>二氢杨梅素>Vc>提取物;对O2-·自由基清除能力:二氢杨梅素>提取物>杨梅素>Vc。2.9种单体化合物的抗菌抗氧化结果:9种单体黄酮类化合物对五种细菌均具有抑菌作用,且随着样品浓度的增加抑菌能力增强。2.1最小抑菌浓度:山奈酚对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和大肠杆菌抑菌的抑菌活性最强,最小抑菌浓度分别为大于0.125mg/m L、小于0.0625g/m和小于0.015625mg/m L;对绿脓杆菌抑菌作用,杨梅素、槲皮素最强,最小抑菌浓度小于0.0625mg/m L;对枯草芽孢杆菌抑菌作用,山奈酚、芦丁、槲皮素最强,最小抑菌浓度小于0.125mg/mL。2.1最小杀菌浓度:其中对金黄色葡萄球菌,杀菌浓度最小的为花旗松素为小于0.25mg/m L;对表皮葡萄球菌,杀菌浓度最小的为杨梅素为小于0.25mg/m L;对大肠杆菌,杀菌浓度最小的为山奈酚,为大于0.0625mg/m L;对绿脓杆菌,杀菌浓度最小的为二氢杨梅素、杨梅素、槲皮素为小于0.125mg/m L;对枯草芽孢杆菌,杀菌浓度最小的为槲皮素,为小于0.25mg/m L。2.3单体化合抗氧化能力:9种黄酮类化合物对三种自由基均具有较强的清除作用,随着浓度的增加清除能力增强。对DPPH自由基清除能力:杨梅素>二氢杨梅素>槲皮素>Vc>山奈酚>花旗松素>芦丁>橙皮素>柚皮素>芹菜素。芹菜素在10μg/m L浓度以下对DPPH由基没有清除作用,柚皮素在6μg/m L以下对DPPH由基没有清除作用。·OH自由基清除能力:杨梅素>山奈酚>芹菜素>二氢杨梅素>Vc>花旗松素>柚皮素>槲皮素>芦丁>橙皮素。对O2-·自由基清除能力:二氢杨梅素>柚皮素>花旗松素>杨梅素>Vc>槲皮素。其余4种即橙皮素、芹菜素、山奈酚和芦丁在该浓度范围内对O2-·自由基没有清除作用。3.显齿蛇葡萄提取物、二氢杨梅素及杨梅素的衍生物生物抗菌结果:提取物乙酰化抗菌结果显示,乙酰化后的抗菌活性并没有显著增强。采用药敏滤纸片法测提取物甲基化的抗菌活性效果并不明显,无法形成完整的抑菌圈,结果不能准确测量。药敏滤纸片法测定的抑菌圈结果显示二氢杨梅素与杨梅素的乙酰化产物浓度为4、2、1mg/m L时,对于四种细菌均具有很好的抑菌效果。并随着浓度的增加抑菌能力增强。二氢杨梅素和杨梅素的抑菌效果稍强于它们的乙酰化产物。杨梅素及其乙酰化产物的抑菌效果强于二氢杨梅素及二氢杨梅素的乙酰化产物。四、五、六乙酰化产物之间抑菌能力无明显差异。
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