断血流具有收敛止血的功效,常用于治疗功能性子宫出血、产后出血等症,但目前有关断血流止血作用物质基础的报道较少。课题组前期基于断血流治疗功能性子宫出血的作用,从断血流中得到化合物断血流皂苷A,且前期有研究者在体外研究了断血流皂苷A对兔血小板聚集和凝血酶时间（TT）的影响,结果证明断血流皂苷A可以促进兔血小板的聚集和显著缩短TT,表明断血流皂苷A可以通过促进血小板聚集加速血栓形成,进而起到止血的作用,及可以影响血浆中纤维蛋白原的作用。本文以断血流皂苷A为研究对象,对断血流皂苷A在体内的药动学、血浆蛋白结合率、组织分布等特征进行了系统研究,以阐明断血流皂苷A的体内处置过程,为断血流皂苷A的成药性、新药开发及给药策略提供实验基础,并为断血流和止血新药的研究奠定基础。1.断血流提取物的制备及断血流皂苷A的含量测定本实验首先制备出断血流中断血流皂苷A含量高的活性部位,再利用大孔树脂富集纯化,制备出含有5.12%-5.60%断血流皂苷A的断血流提取物（干浸膏）,本实验制备的断血流提取物将为断血流皂苷A的药代动力学研究提供样品基础。2.断血流皂苷A在大鼠体内的药动学参数研究首先建立了UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中断血流皂苷A含量的方法,以格列本脲为内标,采用电喷雾（ESI）离子源,在负离子模式下用多反应离子监测（MRM）进行测定。结果表明断血流皂苷A在0.4-409.6 ng·m L^-1的范围内线性关系良好,r²>0.99,定量下限（LLOQ）为0.4 ng·m L^-1,回收率>85%,方法的专属性好,精密度、准确度和稳定性均符合生物样品分析的要求,无明显的基质效应。SD大鼠灌胃给药断血流提取物（断血流提取物（干浸膏）中断血流皂苷A的含量是5.37%）高、中、低剂量(0.36、0.72、1.44 g·Kg^-1),测定给药后大鼠体内断血流皂苷A的血药浓度,用DAS 2.0计算药代动力学参数和绝对生物利用度。灌胃后断血流皂苷A的达峰时间（Tmax）分别为（1.75±0.42）h、（2.25±0.27）h、（2.83±0.26）h,半衰期(t_1/2)分别是（4.61±1.84）h,（5.28±1.78）h,（6.38±1.22）h,静脉注射的t_1/2是（0.76±0.11）h。结果表明灌胃给予断血流提取物时断血流皂苷A的吸收慢、消除快。3.断血流皂苷A与大鼠血浆蛋白结合率研究本课题探讨了断血流皂苷A与大鼠血浆蛋白的结合情况,建立了UPLC-MS/MS测定磷酸盐缓冲液（PBS）中断血流皂苷A含量的方法,内标选用格列本脲,离子源选用电喷雾（ESI）,在负离子模式下进行测定。结果发现待测物在0.1-716.8 ng·m L^-1的范围内有良好的线性关系,r²均大于0.99,定量下限为0.1 ng·m L^-1,回收率均大于85%,方法的专属性、精密度、准确度和稳定性均满足实验的要求。结果表明断血流皂苷A与大鼠血浆蛋白的结合率为（43.86-50.79）%,属于中低强度的结合,与浓度无关。4.断血流皂苷A的组织分布研究本实验首先建立了UPLC-MS/MS测定大鼠组织（心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、子宫、小肠、大肠）匀浆中的断血流皂苷A含量的方法,内标为格列本脲,离子源选用电喷雾（ESI）。结果表明断血流皂苷A在各组织匀浆（心,肝,脾,肺,肾,子宫,大脑）中质量浓度为0.8～307.2 ng·m L^-1的范围内,具有良好的线性关系,r²均大于0.99,定量下限为0.8 ng·m L^-1;断血流皂苷A在各组织匀浆（胃,小肠,大肠）中质量浓度为2～3500 ng·m L^-1的范围内呈现良好的线性,r²均大于0.99,定量下限为2 ng·m L^-1。回收率>85%,方法学考察结果均满足生物样品分析的要求,且没有明显的基质效应。灌胃给药大鼠剂量为0.72 g·Kg^-1的断血流提取物（干浸膏）（生药量/大鼠体重）(相当于断血流皂苷A给药量为38.66 mg·kg^-1),后测定不同组织中断血流皂苷A的分布情况。结果表明断血流皂苷A在大鼠体内分布广泛且迅速,但难以透过血脑屏障,很难到达脑组织。给药后0.5 h,断血流皂苷A在各个组织中的浓度即达到最大值,而后各个组织上药物的浓度随时间的延长,表现出下降趋势。且胃和肠上的浓度显著高于其他组织,表明断血流皂苷A能快速被胃和肠道吸收。且给药后7 h,胃肠道中的断血流皂苷A的浓度仍然高于其他组织器官,这个结果提示断血流皂苷A的分布可能存在胃肠蓄积,容易造成血药浓度低,生物利用度低。