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本研究采用盆栽法探究了接种丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)根内根生囊霉(Rhizophagus intraradices)和外源施钾(K)对宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)在盐胁迫下生长状况、水分养分吸收、光合作用、抗氧化能力及渗透调节的影响。在此基础上,采用TAIL-PCR扩增Lb HAK基因启动子,通过农杆菌介导法将Lb HAK基因启动子导入烟草,经过筛选培养和检测,获得了含有Lb HAK基因启动子的转基因烟草,为进一步揭示AMF调控宁夏枸杞的耐盐机制奠定了基础。主要结果如下:1. 盐胁迫降低了宁夏枸杞总根长、根表面积、根体积、根尖数、根分叉数和生物量,接种AMF提高了宁夏枸杞总根长、根表面积、根体积等根系构型相关指标和生物量。AMF与宁夏枸杞根系形成了良好的共生关系,盐胁迫下菌丝侵染率和总侵染率升高,孢子侵染率降低。AMF定殖与K有关,随着K处理浓度升高,丛枝侵染率上升,K通过提高丛枝侵染率促进宁夏枸杞根系生长,提高了接菌植株的干重。表明AMF和K均可以促进宁夏枸杞生长,且具有协同作用。2. 盐胁迫降低了宁夏枸杞Tr和RWC;盐胁迫下接种AMF显著提高了宁夏枸杞脯氨酸、可溶性蛋白、Tr和RWC;K提高了接菌植株RWC、Tr和未接菌植株i WUE。表明AMF和K可以增强盐胁迫下宁夏枸杞的水分吸收;AMF通过协助宁夏枸杞积累脯氨酸和可溶性蛋白维持渗透平衡,K可以替代脯氨酸进行渗透调节。3. 盐胁迫显著降低了宁夏枸杞根系P、Ca、Mg含量、K/Na和Lb SKOR的表达,显著提高了Na含量和地上Na/根系Na;接种AMF降低了宁夏枸杞Na和地上Na/根系Na,提高了K、P、K/Na、Lb KT1、Lb SKOR、Lb KAT3、Lb HAK;随着K处理浓度的增加,K、K/Na、Lb KT1、Lb KAT3及Lb HAK显著升高,同时K对盐胁迫下宁夏枸杞不同部位的N、Ca也有不同程度的提高。表明AMF减少了盐胁迫下Na在植物地上部分的积累,K和AMF均可以促进盐胁迫下宁夏枸杞养分吸收,通过上调K吸收相关基因提高K和K/Na,维持离子稳态。4. 盐胁迫提高了宁夏枸杞地上H2O2和O2-的含量;AMF降低了地上MDA含量,对植株不同部位POD、CAT活性均有不同程度的提高;高浓度的K处理降低了非接菌植株地上、根系部分的ROS,随着K处理浓度增加,盐胁迫下接菌植株地上部分SOD、POD、AP活性增大。表明AMF和K提高植物部分抗氧化酶的活性清除ROS,增强盐胁迫下宁夏枸杞的抗氧化能力。5. AMF提高了盐胁迫下宁夏枸杞Pn、Gs、Fv/Fm、ΦPSII和q P;随着K处理浓度的增加,提高了盐胁迫下植株的Pn、ΦPSII。表明K和AMF可以减轻盐胁迫对光合系统II的损伤,提高植株净光合作用效率。6. 采用TAIL-PCR技术克隆出Lb HAK启动子序列,通过分析预测,发现包含多个启动子核心元件,与光调控有关的元件,还发现与根瘤菌和AMF共生相关的元件。双酶切获得线性化载体,扩增出5’和3’端分别带有和线性化克隆载体p BI121两末端对应一致同源序列的插入片段,采用一步法克隆试剂盒连接后测序,取阳性质粒农杆菌热激法转化,获得含有Lb HAK基因启动子表达载体的农杆菌。7. 通过设计5组不同激素配比的分化培养基和6组不同成分的生根培养基优化同基因背景烟草植株再生体系,结果显示:NAA:6-BA比例为1:15,含有0.1 mg/L NAA和1.5 mg/L 6-BA的MS培养基为烟草叶片分化培养最适培养基,含有0.1 mg/L NAA的MS培养基最适合诱导生根。对外植体卡那霉素(Kan)浓度耐受程度与影响遗传转化的因素进行筛选,结果显示外植体在菌液OD600值为0.1,侵染时间为5 min时叶片出芽多,分化效果最好,随后在含有100 mg/L Kan和250 mg/L羧苄青霉素(Cb)的分化培养基上筛选培养,最后转到含相同抗性的生根培养基中诱导生根,移栽检测,获得阳性转基因植株。