产毒黄曲霉病害菌对柞水黑木耳生长影响及防治

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黑木耳(Auricularia auricula),属木耳科,木耳属,是我国广泛种植的主要食用菌之一,具有较高的食用及药用价值。黑木耳栽培过程中易受真菌病害的侵害,不仅会造成黑木耳的减产甚至绝收,还会因其产生的毒素给黑木耳的食用带来安全隐患。黄曲霉是黑木耳诸多真菌病害中的一种,因其产生的黄曲霉毒素的毒性较高而被广泛关注。本文以从陕西省柞水县木耳小镇采集的疑似被黄曲霉污染的黑木耳菌包为材料,对其中的黄曲霉进行分离鉴定,并对分离鉴定的黄曲霉菌株的生物学特性、产毒规律、与黑木耳菌丝的相互作用以及黄曲霉毒素在黑木耳生长、干制和泡发过程中的迁移规律和黄曲霉病害及其毒素的防治技术进行研究,主要研究结果如下。经过形态学和分子生物学鉴定,确定从黑木耳污染菌包中分离的菌株为黄曲霉Aspergillus flavus。生物学特性及产毒规律研究结果表明,温度、水分活度以及p H对黄曲霉生长及产毒具有显著影响,黄曲霉最适生长条件为:温度36℃、水分活度0.97、p H 6,黄曲霉最适产毒条件为:温度28℃、水分活度0.97、p H 6。分离得到的黄曲霉只产生黄曲霉毒素B1(AFT B1)和黄曲霉毒素B2(AFT B2)两种类型的毒素,且AFT B1含量显著高于AFT B2;培养7 d时,黄曲霉的毒素累积量最高。黄曲霉菌丝和黑木耳菌丝具有相互抑制作用,且黑木耳菌丝对黄曲霉菌丝的抑制作用更强;黑木耳菌丝通过缠绕、附着、融合到黄曲霉菌丝上抑制黄曲霉菌丝生长,黄曲霉孢子也会附着在黑木耳菌丝上抑制黑木耳菌丝生长。黄曲霉液态培养液对黑木耳菌丝具有显著抑制作用,培养时间越长,产生的小肽和酸类等代谢产物越多,对黑木耳菌丝的抑制作用越强。黄曲霉的挥发性物质对黑木耳菌丝的抑制作用不显著,但黑木耳菌丝的挥发性物质对黄曲霉菌丝具有显著抑制作用,其中起抑制作用的主要挥发性物质为2-丁酮、2-丁酮二聚体、异戊醇、丙酮等。新鲜的黑木耳子实体对黄曲霉菌丝的生长具有显著的抑制作用,经过灭菌处理后,黑木耳子实体对黄曲霉菌丝生长的抑制作用显著降低,但能有效降低黄曲霉毒素的产量。黑木耳与黄曲霉在黑木耳菌包中的共培养试验结果表明,接种初期,黄曲霉是优势菌种,菌丝快速长满整个菌包;随着培养时间的延长,黑木耳菌丝缓慢生长,逐渐覆盖黄曲霉菌丝并长满整个菌包,成为优势菌种。黄曲霉毒素会从培养基向黑木耳菌丝和子实体发生迁移,但迁移率较低,都在10(?)以下;黑木耳菌丝在生长过程中对黄曲霉毒素具有较强的降解作用;热风干燥能够降低黑木耳子实体中的黄曲霉毒素含量;泡发可以促使黑木耳子实体中的黄曲霉毒素溶出,有效降低黑木耳中的黄曲霉毒素含量,降低效果与泡发水温和泡发时间呈正相关,干黑木耳用料液比1:50(g/m L)的50℃温水泡发60 min,再用1:50的自来水漂洗1次后,其中AFT B1的含量下降73.53%,AFT B2未检出。紫外照射可有效降解AFT B1,降解率与照射时间呈正相关;高效绿霉净、咪鲜胺锰盐、多菌灵和代森锰锌四种杀菌剂对黄曲霉生长及产毒的抑制作用显著,EC50值介于0.30-6.11 mg/L之间,毒力强弱顺序为:咪鲜胺锰盐>多菌灵>高效绿霉净>代森锰锌;唐菖蒲伯克霍尔德氏菌、吉氏不动杆菌、解淀粉芽孢杆菌以及四种乳酸菌对黄曲霉的生长和产毒都具有显著抑制作用;淀粉芽孢杆菌和植物乳杆菌对AFT B1具有显著的降解作用,降解率均在80%以上,并且对黑木耳菌丝的影响较小,可作为生物防治菌使用。
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