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小檗碱对于脑缺血性损伤得保护作用得到人们越来越多的关注和认可。脑中风的过程中常伴随有神经元的大量死亡从而发生神经功能减退。己经证明终末分化的神经元一旦进入细胞周期即诱导凋亡。因此，在脑缺血再灌损伤中如何避免神经元进入细胞周期、进而诱导调亡是值得关注的内容。小檗碱在脑缺血损伤抑制凋亡的过程中，对神经元细胞周期有何影响，以及这种影响在小檗碱神经元保护作用中占有何种地位？对此我们进行了较为深入系统的研究。在利用MTT、Annexin V-FITC/PI染色流式检测鉴定了体外缺糖缺氧对细胞诱导凋亡后，发现体外OGD模型使细胞周期发生了变化，小檗碱能够使G0/G1期细胞的百分比显著性升高。体外采用PC12细胞和原代神经元很好的验证了小檗碱抗凋亡和诱导细胞周期阻滞的作用。通过Western blot和实时荧光定量PCR检测发现，小檗碱一方面显著的抑制活化的Caspase3并促进Bad的磷酸化；另外一方面可以显著的抑制G0/G1期调节蛋白CyclinD1、p53和Rb蛋白的磷酸化，同时增加总Rb蛋白的含量。小檗碱的这种作用在小鼠脑缺血模型中也得到很好的验证。为了探讨周期调控因子在小檗碱发挥神经保护作用中的重要性，我们引入了siRNA或者利用慢病毒构建稳定转染的敲低或过表达细胞。结果证明小檗碱的保护作用是通过CyclinD1、p53和Rb这三个细胞周期调节因子来完成的，并通过下调CyclinD1进而抑制Rb蛋白的磷酸化。同时，我们还发现小檗碱具有激活脑缺血复灌时PI3K/AKT通路的作用。在神经细胞缺糖缺氧和复灌两个阶段，小檗碱对上述因子表达表现出一定的选择性。即：在缺糖缺氧阶段显著的诱导细胞周期阻滞，在复灌阶段则主要激活PI3K/AKT通路。我们将小檗碱的这种综合作用特点比喻为小檗碱的“冬眠”-“复苏”效应。在上述工作的基础上，我们对小檗碱促进Rb蛋白表达的机理作了进一步研究。通过建构Rb启动子以及去除和含有Rb poly(A)加尾信号的质粒，最终确定了小檗碱升高Rb蛋白含量的机理与Rb mRNA的升高有关，而后者则是通过小檗碱与poly(A)的结合、进而抑制mRNA的降解实现的。本工作对阐释小檗碱治疗脑缺血再灌损伤的药理作用提供了新的实验依据，也为小檗碱作用机制的研究提供了新思路。