目的：　　 肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤,大约30-40％的非小细胞肺癌就诊时已经存在多发转移,预后极差。尽管现在的治疗手段不断发展,5年生存率仍不足15％。化疗是目前晚期肺癌常用的治疗手段,目前常用的化疗方案一般联用铂类和第三代化疗药物,如紫杉类、吉西他滨、长春瑞滨、依立替康等。研究表明,上述化疗方案尽管作用机制不同,但在治疗效果方面差异没有统计学意义,各种方案的药物反应率均不足40％,这足以说明,目前肺癌的化疗疗效已经进入了平台期,如何提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,已经成为近年来研究的热点问题。　　 唑来膦酸是第3代含氮的杂环双膦酸盐药物,是第一个也是唯一被证实对多种实体肿瘤引起的骨转移有效的药物,与前2代双膦酸盐相比,起效更快、缓解率更高、持续时间更长。临床前研究提示唑来膦酸除了对骨吸收有抑制作用外,还具有直接的体内外抗肿瘤作用,且与标准抗癌药物/COX-2抑制剂联用具有协同作用。为此我们进行了唑来膦酸对肺癌细胞株A549是否有生长抑制及诱导凋亡作用,并观察其与吉西他滨联用是否有协同作用的体外实验。本研究旨在探讨唑来膦酸在体外对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549的生长抑制及诱导凋亡的作用,进一步研究唑来膦酸与细胞毒性药物吉西他滨对A549细胞是否具有协同作用。　　 方法:　　 应用MTT法测定不同剂量的唑来膦酸、吉西他滨及二药联合对A549的生长抑制率,选择IC20及IC50的唑来膦酸浓度为适宜浓度,实验分组为:空白对照组,Z组:唑来膦酸组(IC20,IC50),G组:吉西他滨组(IC20),及G+Z组:联合组(唑来膦酸+吉西他滨),采用流式细胞术检测不同分组的细胞周期、细胞凋亡率。用透射电子显微镜观察不同分组细胞形态学改变。　　 结果:　　 1、唑来膦酸对肺癌A549细胞系有增殖抑制作用　　 0.1-200μmol/L的唑来膦酸对A549细胞有明显的生长抑制作用,且呈时间依赖性及剂量依赖性效应,ZOL浓度从0.1μmol/L上升到200μmol/L时,随着ZOL浓度的升高,细胞存活率明显降低,有剂量效应关系。并且随着作用时间的延长,对A549细胞抑制率增加,表明唑来膦酸对肺癌细胞抑制作用有时间依赖性。　　 2、吉西他滨对肺癌A549细胞系生长的抑制作用　　 0.0001-10μg/mL的吉西他滨对A549细胞均有抑制作用,且随着药物浓度的增加及作用时间的延长,抑制作用明显增强,吉西他滨对A549细胞72h的IC20:0.002μg/ml。　　 3、Z组,G组,及G+Z组对A549细胞系的细胞周期影响　　 唑来膦酸作用72h后,G0/G1期(DNA合成前期)的细胞百分比明显高于空白对照组(P＜0.05),将周期阻滞在G0/G1期。吉西他滨作用72h后,S期(DNA合成期)的细胞百分比高于空白对照组(P＜0.05),将肿瘤细胞阻滞在S期,减少进入G2、M期的细胞数目。联合组:随着药物浓度的增加,G0/G1期比例略下降,S期比例增大,G2/M期比例下降明显,表现为S期阻滞。　　 4、Z组,G组,及G+Z组对A549细胞凋亡率的影响　　 1μmol/L,10μmol/L浓度的ZOL作用72h后,对A549细胞均有诱导凋亡作用,细胞凋亡率分别为16.94％、30.1％,ZOL与吉西他滨联用作用72h后,细胞凋亡率较唑来磷酸单药、吉西他滨单药明显升高,吉西他滨(0.001μg/mL)单药及ZOL(1μmol/L)+吉西他滨(0.001μg/ml)、ZOL(10μmol/L)+吉西他滨(0.001μg/ml)联合用药组的细胞凋亡率分别为39.7％、42.9％和52.0％。　　 5、透射电子显微镜观察到细胞形态改变　　 从透射电子显微镜摄片观察各组细胞超微结构:唑来膦酸组细胞呈现凋亡早期形态学改变,细胞体积缩小,染色质边聚,核膜成新月状;吉西他滨组细胞体积增大,可见异染色质凝聚;联合组细胞肿胀,异染色质高度边集,呈半月形,核着边,呈现明显凋亡中期改变。　　 结论:　　 1、唑来膦酸单独作用对肺癌细胞系A549具有明显抑制增殖及诱导凋亡作用,呈剂量、时间依赖性。　　 2、唑来膦酸与吉西他滨联用能协同抑制肺癌细胞系A549的增殖及诱导凋亡。　　 3、唑来膦酸作用于肺癌细胞系A549可以干扰其DNA合成,其作用机制是通过诱导细胞凋亡来实现的。