硅壳荧光纳米颗粒与细胞相互作用的研究及其在溶酶体标记中的应用

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近年发展起来的具有制备简单、分散性好的硅壳生物纳米颗粒为生命过程机制的阐明、人类疾病机理的研究、临床医学诊断和治疗提供了全新的技术和方法。本研究小组已在硅壳生物纳米颗粒的制备及其在生物医学领域中的应用等方面取得了突破性的进展,并对硅壳生物纳米颗粒的制备机理和生物亲和性等进行了系统的研究和深入的探讨,但是有关硅壳纳米颗粒与细胞相互作用及细胞吞噬硅壳纳米颗粒生物学机制的基础性研究还没有文献报道。本论文瞄准这一重要研究方向,开展了硅壳荧光纳米颗粒与细胞相互作用的研究工作,并在此基础上首次将SiO2荧光纳米颗粒应用于细胞器溶酶体的标记。(1)、细胞吞噬表面电荷不同的硅壳荧光纳米颗粒的研究以表面带负电荷的SiO2荧光纳米颗粒和表面带正电荷的氨基化SiO2荧光纳米颗粒为代表,利用硅壳荧光纳米颗粒的荧光信号同步指示作用,考察了HepG、MCF-7和L-02细胞对表面电荷不同的硅壳纳米颗粒的吞噬。细胞对表面电荷不同的硅壳纳米颗粒的吞噬依赖于纳米颗粒的浓度和培育时间,并受纳米颗粒表面电荷以及细胞培养基中血清的影响,这为有针对性地对硅壳荧光纳米颗粒的表面进行修饰或改性,提高颗粒在细胞培养介质中的稳定性,使其更好地用于细胞生物学领域提供了理论依据。(2)、HeLa细胞吞噬SiO2荧光纳米颗粒生物学机制的初步探讨在第一部分研究工作的基础上,针对HeLa细胞吞噬SiO2荧光纳米颗粒的生物学机制进行了初步探讨。HeLa细胞对SiO2荧光纳米颗粒吞噬是一个依赖于纳米颗粒初始浓度和培育时间并逐渐达到饱和的耗能过程; 同时,高渗透压的蔗糖溶液、无K+缓冲液、微管抑制剂nocodazole都抑制了HeLa细胞对SiO2荧光纳米颗粒的吞噬。所以,HeLa细胞对SiO2荧光纳米颗粒的吞噬是在液相内吞和吸附内吞二者共同的作用下完成的。同时,细胞中的微管对控制纳米颗粒在胞内的运转过程中起到了一定的作用。
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