背景：　　反复种植失败（Repeated implantation failure,RIF），目前认为移植3次或3次以上均有一个优质胚胎或多次移植胚胎总数量>10枚依然未能获得临床妊娠，是当前生殖医学领域中重点关注的部分之一，约占人类辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technology，ART）的5％-10%。RIF的病因可能是单因素或多因素，发生机制尚未明确。目前研究发现导致RIF的病因可能有染色体异常、内分泌异常、卵子质量、胚胎质量不佳、子宫宫腔形态异常、免疫异常、环境心理因素等。近年来的研究发现，RIF与胚胎质量和子宫内膜容受性密切相关。如何改善RIF患者的临床妊娠结局，也成为生殖医学领域研究的重点问题。　　我们的临床工作中发现RIF患者约占本中心患者的7.89%，这类患者的治疗较为棘手。排除输卵管积水、宫腔粘连等可以改善治疗的因素后，可以选择治疗的方案较少。目前临床上较多的以生长激素（growth hormone，GH）作为RIF的辅助药物治疗。国内外学者通过大量的实验研究发现生长激素能促进卵泡的发育生长、改善卵巢功能并提高卵子质量、调节免疫功能等。动物实验证实生长激素可改善子宫内膜的容受性。动物实验也证明了卵泡颗粒细胞和卵泡膜细胞里存在生长激素受体（growth hormone receptor，GHR），并且存在高度亲和力。GH通过上调胰岛素生长因子-1（insulin Like growth factor-1,IGF-1）的合成，放大卵泡刺激素（folliclestimulating hormone，FSH）对颗粒细胞类固醇激素合成的作用。类固醇快速调节蛋白(steroidog enic acute regulatory pro tein,StAR)在类固醇合成中起关键作用，但其与GH的关系尚未明确。此外,干细胞因子(stem cell factor，SCF)是一类具有广泛生物学功能的酸性糖蛋白，有学者研究表明人类卵巢内的颗粒细胞、卵泡膜细胞和间质细胞均能合成分泌SCF。它可以使卵母细胞发育和成熟，也能直接作用于卵泡膜细胞促进其生长和分化。在RIF患者治疗中加用GH后是否影响SCF因子浓度的变化，从而影响卵母细胞发育和成熟，则有待进一步研究。　　目前生长激素应用于RIF患者的相关报道较少，其作用机制未阐明，这也成为学术界研究的热点。本研究旨在探讨生长激素对反复种植失败患者的临床疗效及其作用机制。　　研究内容　　第一部分探讨生长激素对反复种植失败患者的临床疗效　　目的：　　探讨反复种植失败患者在再次行IVF-ET促排周期中加用GH后的临床疗效，为临床应用提供理论依据。　　研究方法：　　回顾性分析2011年10月-2013年4月在广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科行IVF-ET的RIF患者113例，其中再次行IVF-ET周期中加用生长激素的患者为研究组（74例），未使用生长激素的患者为对照组（39例）。研究组与其既往周期进行自身对照研究，比较两者基本临床资料、控制性促排卵（controlled ovarian simulation，COS）方案资料；比较研究组和对照组患者的基本临床资料、COS方案资料、临床妊娠结局等；；比较研究组中种植成功者与种植失败者的年龄、BMI、获卵数、优质胚胎数、HCG日子宫内膜厚度等。　　研究结果：　　1.研究组的患者与其既往周期的自身对照研究发现：两者的基础FSH、LH、E2、基础卵泡数、月经周期、GnRH用量、Gn总量、Gn天数、HCG日≥14mm的卵泡数等差异无统计学意义；（P>0.05）研究组HCG日E2水平、HCG日子宫内膜厚度、优质胚胎数和冷冻胚胎数较其既往周期有明显增加，差异均有统计学意义。（P<0.05）　　2.研究组和对照组的基本临床资料比较：两组患者年龄、BMI、基础FSH、LH、E2、月经周期、基础卵泡数、GnRH量、Gn启动量、Gn天数、Gn总量等均差异无统计学意义；（P>0.05）研究组患者HCG日的子宫内膜厚度较对照组患者子宫内膜厚度增厚，HCG日E2水平也较对照组的E2水平增加，差异有统计学意义；（P<0.05）两组患者的获卵数、2PN胚胎数、冷冻胚胎数差异无统计学意义；（P>0.05）研究组的HCG日≥14mm的卵泡数目较对照组增多，但差异无统计学意义；（P>0.05）GH组的优胚数量较对照组明显增加，差异有统计学意义；（P<0.05）在移植胚胎数无统计学差异的情况下，研究组的胚胎种植率和临床妊娠率、活产率都较对照组提高，差异有统计学意义；（P<0.05）研究组的流产率比对照组的流产率降低，但差异无统计学意义。（P>0.05）　　3.GH组中种植成功患者共34例，种植失败患者共40例，余一般资料均无统计差异，成功组的HCG日子宫内膜厚度明显较失败组增厚，差异有统计学意义。（P<0.05）　　结论　　1.研究组较其既往周期在优质胚胎数、冷冻胚胎数、HCG日子宫内膜厚度、HCG日E2水平明显提高，从而可提高胚胎种植率、临床妊娠率、活产率等，提示GH有重要的治疗意义。　　2.研究组较对照组在HCG日E2水平、HCG日子宫内膜厚度、优质胚胎数、胚胎种植率、临床妊娠率、活产率明显提高，提示GH应用于RIF患者中的临床疗效是较理想的。　　3.加用GH后，种植成功32例与种植失败40例HCG日子宫内膜厚度比较，提示GH可能改善子宫内膜厚度。　　第二部分探讨生长激素在反复种植失败患者中的作用机制　　目的：　　观察生长激素对反复种植失败患者颗粒细胞中GHRmRNA、STARmRNA，血清中GH、IGF-1，卵泡液中GH、IGF-1、SCF因子的影响，探讨生长激素在反复种植失败患者治疗中的作用机制。　　研究方法：　　2012年2月-2012年10月在广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科行IVF—ET治疗的反复种植失败患者共42例，其中加用GH共22例为研究组，未加用GH共20例为对照组。研究组从Gn启动日当天开始皮下注射GH(思真，saizen)4IU至HCG日。将研究组和对照组患者临床资料进行比较。两组均于HCG日采集血清，取卵日收集卵泡液，酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清GH、IGF-1水平和卵泡液中GH、IGF-1、SCF水平，逆转录-聚合酶链式反应（Reverse transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）检测颗粒细胞GHRmRNA、StAR mRNA的表达。　　研究结果：　　1.研究组和对照组的临床资料对比，两组患者的年龄、BMI、基础性激素等一般情况均差异无统计学意义；（P>0.05）研究组HCG日子宫内膜厚度较对照组明显增加，且差异有统计学意义。（P<0.05）　　2.研究组血清、卵泡液中的GH、IGF-1水平较对照组明显增高，差异有统计学意义；（P<0.05）。研究组卵泡液SCF的水平也明显高于对照组，差异有统计学意义；（P<0.05）各组血清与卵泡液中GH、IGF-1水平比较发现，两组卵泡液中的GH、IGF-1都比血清低，且差异有统计学意义。（P<0.05）　　3.卵泡液中GH水平与卵泡液中的IGF-1、SCF水平呈正相关。（P<0.05）　　4.研究组的GHRmRNA表达量较对照组增高，差异有统计学意义；（P<0.05）StARmRNA的相对表达量两组间差异无统计学意义。（P>0.05）　　5.卵泡液中GH水平与颗粒细胞上的GHRmRNA表达量呈正相关。（r=0.460,P<0.05）　　6.研究组的临床妊娠率、活产率明显提高。　　7.研究组中种植成功组HCG日子宫内膜厚度较种植失败组增厚，且差异有统计学意义。（P<0.05）　　结论　　1.RIF患者加用GH后，其临床妊娠率、活产率得到提高，机制可能与提高血清、卵泡液GH、IGF-1及卵泡液SCF水平等有关，且发现卵泡液GH的水平与卵泡液的IGF-1、SCF水平呈正相关。　　2.研究组颗粒细胞的GHRmRNA的表达量较对照组增高，且卵泡液中GH水平与颗粒细胞上GHRmRNA的表达量呈正相关，提示外源性加用GH可能通过上调GHRmRNA的表达量来充分发挥作用。StARmRNA的相对表达量两组间差异无统计学意义。　　3.研究组中种植成功组子宫内膜厚度较种植失败组增加。