目的:参考去氧孕烯炔雌醇片已上市的参比制剂(妈富隆)进行仿制药临床前研究。开发出与参比制剂质量一致的仿制品,通过对参比制剂的质量剖析,确定仿制品的处方工艺,并与参比制剂在外观、处方、工艺、溶出度、含量、有关物质、放置稳定性等方面的全面对比以达到仿制品与参比制剂的质量一致,确保仿制品安全、有效、质量可控,最终达到与参比制剂生物等效。方法:处方前研究中用摇床法测定原料药在不同pH介质中的溶解度;根据参比制剂处方进行了原、辅料相容性试验并同时进行了原料药的影响因素试验;利用X射线粉末衍射法得到原料药的粉末衍射图谱。根据参比制剂公开的处方信息及对参比制剂的剖析初步确定本品的处方工艺。以溶出、含量及有关物质等为评价指标,对去氧孕烯炔雌醇片处方中填充剂、润滑剂、抗氧剂的处方量进行筛选;考察了制备工艺对制剂稳定性及溶出的影响,考察处方中抗氧剂搅拌时间、湿法制粒溶剂的种类、包装材料对制剂稳定性的影响,考察制剂在高温、高湿及光照条件下的稳定性。与原研品进行质量对比研究,进行了处方工艺的中试放大。建立了去氧孕烯炔雌醇片溶出度测定的HPLC方法,进行了溶出度检测方法的方法学验证,对溶出介质的SDS浓度、溶出试验的转速、溶出样品处理方式进行比较,确定了去氧孕烯炔雌醇片的溶出条件,并与原研品在不同pH值溶出介质中进行溶出行为对比研究;建立了去氧孕烯炔雌醇片主药及抗氧剂含量测定的HPLC方法并进行了方法学验证;建立了去氧孕烯炔雌醇片有关物质测定的HPLC方法并进行了方法学验证。进行了中试样品及参比制剂的影响因素试验、加速试验及长期试验,并进行了对比研究。结果:处方前研究结果显示,去氧孕烯在水、pH1.2、pH2.0、pH3.6、pH4.5、pH5.8、pH6.6、pH7.8的水溶液及0.05%(W/W)SDS的水溶液中溶解度分别为0.06、0.1、0.03、0.25、0.04、0.08、0.09、0.08和1.4μg/ml,炔雌醇在水、pH1.2、pH2.0、pH3.6、pH4.5、pH5.8、pH6.6、pH7.8的水溶液及0.05%(W/W)SDS的水溶液中溶解度分别为8.0、9.3、12.1、25.3、9.3、10.4、13.9、10.1和10.7μg/ml,结果表明去氧孕烯和炔雌醇在不同pH水溶液中溶解度均为几乎不溶或不溶(参见中国药典凡例)。根据本品溶出方法中溶出介质体积为500ml计算,去氧孕烯在不加SDS的水及不同pH溶出介质中均不能满足溶出漏槽条件。根据溶解度试验结果及所检索文献信息,初步判定去氧孕烯为生物药剂学系统(Biopharmaceutics classification system BCS)分类中的第二类药物,炔雌醇为第一类药物。原、辅料相容性试验结果显示参比制剂中所用到的二氧化硅和硬脂酸与原料药发生相互作用,这两种辅料在实际处方中用量较小,为达到与参比制剂处方一致,处方中继续应用。原料药在制剂中所占质量比低,导致X粉末衍射测定时原料药的特征峰被辅料峰掩盖,无法准确判断自制品与原研品所用原料药是否为同一晶型。处方筛选及工艺优化结果显示当二氧化硅和硬脂酸分别为2.0mg/片时,二氧化硅和硬脂酸在湿法制粒工艺之后加入时,颗粒流动性、可压性及含量均匀度和溶出度均合格,且与原研品在不同pH介质中的溶出曲线相似。进一步确定了抗氧剂α-生育酚的处方量、硬脂酸和二氧化硅处方量、原料药-抗氧剂溶液搅拌时间、不同制粒溶剂、以及包衣和不包衣对稳定性的影响,参考原研品包装筛选了自制品不同包装。建立了去氧孕烯炔雌醇片溶出度测定方法,采用《中国药典》2015年版四部溶出度与释放度测定方法第二法(桨法),采用500ml 0.05%的十二烷基硫酸钠水溶液为溶出介质,转速为50rpm,溶出时间为30min,方法学验证试验结果表明,去氧孕烯在0.06-0.36μg/ml范围、炔雌醇在0.012-0.072μg/ml范围内线性关系良好,方法的专属性、准确度、精密度和回收率及溶液稳定性、方法耐用性均达到要求。考察了不同转速(50、75r/min)和溶出介质中SDS的浓度水平(0.02%、0.05%、0.1%),比较了自制品与原研品在不同pH(0.05%SDS水溶液、pH1.2、pH4.5、pH6.6)值溶出介质中的溶出曲线,结果表明自制品与原研品体外溶出行为一致。建立了去氧孕烯炔雌醇片含量测定方法,处方中抗氧剂α-生育酚的含量测定方法。去氧孕烯在0.48-300.0μg/ml(Y=14.199X+27.822,r=0.9995)、炔雌醇在0.24-60.0μg/ml(Y=29.357X+1.0733,r=1.0000)、α-生育酚在1.6-80.0μg/ml(Y=30.236X–78.302,r=0.9993)范围内线性关系良好,样品在12h内放置稳定性良好,回收率试验表明去氧孕烯、炔雌醇和α-生育酚回收率均在98.0%-102.0%范围内,方法专属性、准确度、溶液稳定性均符合要求;去氧孕烯、炔雌醇和α-生育酚检测限(LOD)分别为27ng/ml、4.8ng/ml、0.32ng/ml;定量限(LOQ)分别为0.48μg/ml、0.24μg/ml、0.80μg/ml。建立了去氧孕烯炔雌醇片有关物质检测方法,规定了3种杂质(杂质D、杂质E、杂质G)的限度,分别做了三种已知杂质的检测限、定量限、线性、精密度、及溶液稳定性。分别测定了杂质D、E、G的线性,结果显示杂质D和杂质E在0.075-2.25μg/ml、杂质G在0.03-0.3μg/ml范围内线性良好,经酸、碱、氧化、光照和高温破坏实验证明方法专属性良好。结论:本文通过湿法制粒工艺制备了去氧孕烯炔雌醇片,通过文献检索及对原研品的剖析及自制品与原研品的质量对比,确定了自制品的处方工艺和包装条件。建立了主成分含量、溶出度及有关物质检测方法,并进行了方法学验证。所制备的去氧孕烯炔雌醇片含量、溶出与原研品一致,经稳定性试验考察,自制品与原研品有关物质相当。