两种罗布麻黄酮类化合物积累规律及其抗氧化活性研究

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罗布麻(Apocynum venetum L.)为夹竹桃科(Apocynaceae)罗布麻属多年宿根半灌木,是我国的传统中药材,主治高血压、心脑血管疾病等病症。大麻状罗布麻(A.cannabinum L.)是罗布麻属的模式种,我校罗布麻课题组引种于美国。很多研究表明罗布麻的药用成分和生物活性成分主要以黄酮类化合物为主,但是目前对大麻状罗布麻药用成分的研究近乎空白。因此,本文采用硝酸铝比色法测定总黄酮含量,用高效液相色谱法测定两种黄酮单体(表没食子儿茶素EGC和表儿茶素EC)的含量,用体外自由基清除试验测定抗氧化活性,对两种罗布麻不同生长发育阶段中(返青期、苗期、初花期、盛花期、末花期、果实成熟期和落叶期)各个器官(根、茎、叶、花、果实和种子)总黄酮、黄酮单体动态积累规律和抗氧化活性开展了研究,获得以下结果:1、罗布麻各器官及全植株总黄酮含量均高于大麻状罗布麻,且两种罗布麻总黄酮含量在各部位中的表现不一致。罗布麻不同器官总黄酮平均含量高低表现为:叶(119.89 mg·g-1)>种子(116.54 mg·g-1)果实(95.77 mg·g-1)>根(92.66 mg·g-1)>花(89.93 mg·g-1)>茎(48.33 mg·g-1);大麻状罗布麻总黄酮含量表现为:果实(91.47 mg·g-1)>种子(79.54 mg·g-1)>根(58.03 mg·g-1)>花(49.36 mg·g-1)>叶(48.01 mg·g-1)>茎(37.95 mg·g-1)。罗布麻全植株总黄酮含量比大麻状罗布麻提高了 54.55%。2、罗布麻各生育期内总黄酮含量均显著高于大麻状罗布麻,且不同生育期两种罗布麻的总黄酮含量表现不一致。罗布麻各生育期总黄酮平均含量为:苗期(124.97 mg·g-1)>初花期(94.47 mg·g-1)>落叶期(92.39 mg·g-1)>盛花期(85.77 mg·g-1)>果实成熟期(84.57mg·g-1)>末花期(83.56 mg·g-1)>返青期(27.62 mg·g-1);大麻状罗布麻总黄酮平均含量为:末花期(75.26 mg·g-1)>果实成熟期(69.16mg·g-1)>盛花期(59.74 mg·g-1)>落叶期(57.99 mg·g-1)>苗期(39.84 mg·g-1)>初花期(31.92 mg·g-1)>返青期(26.64 mg·g-1)。3、罗布麻各生育期内表没食子儿茶素(EGC)含量均显著高于大麻状罗布麻,且不同生育期两种罗布麻的EGC含量表现出了类似的变化规律,苗期EGC含量最高,其次是花期和果实成熟期。罗布麻各生育期EGC平均含量为:苗期(4.81 mg·g-1)>初花期(3.53 mg·g-1)>盛花期(3.42mg·g-1)>果实成熟期(2.23 mg·g-1)>末花期(2.10 mg·g-1)>落叶期(2.08 mg·g-1)>返青期(2.01 mg·g-1);大麻状罗布麻EGC平均含量为:苗期(3.86 mg·g-1)>盛花期(2.33 mg·g-1)>末花期(1.52 mg·g-1)>初花期(1.46 mg·g-1)>果实成熟期(1.32 mg·g-1)>落叶期(0.93 mg·g-1)。4、两种罗布麻表儿茶素(EC)含量均在生长盛期达到最高。罗布麻各生育期EC平均含量高低表现为:初花期(1.99 mg·g-1)>苗期(1.15 mg·g-1)>盛花期(1.07 mg·g-1)>末花期(0.73 mg·g-1)>落叶期(0.59 mg·g-1)>果实成熟期(0.52mg·g-1)>返青期(0.41 mg·g-1);大麻状罗布麻EC平均含量表现为:盛花期(0.74 mg·g-1)=果实成熟期(0.74 mg·g-1)>初花期(0.73 mg·g-1)>末花期(0.68 mg·g-1)>落叶期(0.65mg·g-1)>苗期(0.58 mg·g-1)。5、两种罗布麻中黄酮类化合物均具有良好的抗氧化活性,且黄酮类化合物在抗氧化成分中占主导;罗布麻的叶片和大麻状罗布麻的果实的抗氧化活性最高。以谷胱甘肽(G-SH)为对照,罗布麻各器官总黄酮提取物对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基平均清除率为:叶(84.76%)宁夏大学硕士学位论文>果实(64.05%)>花(60.11%)>种子(53.01%)>G-SH(48.29%)>根(47.46%)>茎(33.71%),对ABTS+(2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐)自由基平均清除率为:G-SH(53.33%)>叶(51.49%)>花(27.46%)>果实(24.81%)>根(21.84%)>种子(16.09%)>茎(15.61%);大麻状罗布麻各器官对DPPH自由基平均清除率为:果实(61.35%)>G-SH(48.29%)>种子(46.00%)>叶(33.31%)>根(31.60%)>花(28.43%)>茎(24.73%),对 ABTS+自由基平均清除率为:G-SH(53.33%)>果实(22.44%)>种子(18.71%)>根(14.93%)>叶(12.73%)>花(8.53%)>茎(8.24%)。DPPH和ABTS+两种自由基清除活性均与其总黄酮含量呈现极显著相关性(P<0.01)。综上所述,罗布麻中总黄酮含量及黄酮单体EGC含量均高于大麻状罗布麻,说明产自中国的罗布麻比自美国引种的大麻状罗布麻具有更好的药用价值;而良好的抗氧化活性证明两种罗布麻均具有较好的抗氧化功效。此外,罗布麻叶片中的总黄酮含量、EGC含量和抗氧化活性,不仅高于罗布麻的其他部位,也显著高于大麻状罗布麻,这些都说明罗布麻叶片是最优的利用部位,也证明了罗布麻被称为野茶是名副其实的。
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