【研究背景及目的】肿瘤是一类细胞周期性疾病,如若细胞启动过程、信号转导通路等出现故障,可使细胞周期进程失控,导致细胞异常增殖,最终可能发展为肿瘤。周期蛋白依赖性激酶样3（cyclin-dependent kinase like 3,CDKL3）是周期蛋白依赖性激酶样（cyclin-dependent kinase like,CDKL）家族的一员,近年来部分研究发现CDKL3的水平调节与骨肉瘤,食管鳞状细胞癌的细胞周期及细胞增殖密切相关,然而CDKL3在肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）中的生物学意义与临床意义未见报道。肝细胞癌是肝癌最主要的组织学类型,是发生最普遍的癌症之一,在我国的男性癌症相关死因中排第四位。鉴于CDKL3的结构中存在与细胞周期蛋白依赖性激酶（Cyclin-dependent Kinase,CDK）及有丝分裂原激活蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPKS）的同源序列,且CDKL3与部分其他肿瘤发生发展的密切关系已得研究证实,因此我们作出假设CDKL3可能会调节肝细胞癌的细胞周期并驱动肝细胞癌的发生和发展,为肝癌的防治提供新思路。【研究方法】1.检测了3株人肝癌细胞株及人正常肝细胞中CDKL3的m RNA表达。2.慢病毒感染肝癌细胞株Hep G2,SMMC-7721,Huh-7并沉默肝癌细胞株中CDKL3的表达,于倒置荧光显微镜下观察感染效率,QRT-PCR、蛋白免疫印迹法检测CDKL3的敲低效率。2.CCK8细胞增殖实验、克隆形成实验检测CDKL3沉默后,肝癌细胞株的增殖能力;Transwell迁移实验,细胞划痕实验检测CDKL3沉默后,肝癌细胞株的迁移能力。3.Tunel一步法检测CDKL3沉默后,肝癌细胞株的凋亡率;细胞周期实验检测CDKL3沉默后肝癌细胞株的细胞周期;裸鼠皮下成瘤实验检测CDKL3沉默后肝细胞癌在体内环境的发生发展能力。4.蛋白免疫印迹法检测CDKL3沉默后,ERK1/2,p-ERK1/2,AKT,p-AKT蛋白的表达。【研究结果】1.与正常人肝细胞相比,3株肝癌细胞株中CDKL3的m RNA含量较高。2.肝癌细胞株的慢病毒感染效率达到80%以上,感染后肝癌细胞株中CDKL3的m RNA含量降低,蛋白表达下调。3.CCK8和克隆形成实验结果表明CDKL3敲低后,肝癌细胞株的增殖能力显著降低。Transwell和划痕实验结果表明CDKL3敲低后,肝癌细胞株的迁移能力显著降低。4.CDKL3敲低后,肝癌细胞株的凋亡率达到90%且细胞周期被阻滞。裸鼠成瘤实验结果显示CDKL3敲低后的肝癌细胞于裸鼠体内的成瘤能力显著降低,瘤体体积更小,生长速度更慢。5.ERK1/2蛋白表达相同的情况下,CDKL3沉默后,p-ERK1/2蛋白表达减少。【结论】1.CDKL3可介导肝癌细胞的增殖、迁移、凋亡,周期等生物学行为。2.CDKL3可能是通过Erk信号通路介导肝细胞癌的发生发展。