黑龙江省MTB耐药状况及耐药基因突变特点

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目的:了解黑龙江省结核病患者的耐药情况。了解本地区MDR-MTB菌株耐药相关基因的突变频率以及突变特点。   方法:收集2007年5月~2009年7月临床确诊为结核病的住院病人分枝杆菌临床分离菌株共625株,采用BD公司的BACTEC960全自动快速分枝杆菌培养鉴定系统对菌株进行培养和耐药性检测。灭活后提取基因组DNA,经分子鉴定的方法鉴定MTB。选取其中部分MDR-MTB菌株,采用PCR方法扩增rpoB基因,katG和inhA基因,gyrA基因,rrS基因五个耐药相关基因并对其序列进行分析。采用试剂盒对部分菌株进行MIC检测。   结果:①2007年05月-2009年07月入选菌株625株,总耐药率为59.68%,其中初治耐药率52.4%,复治耐药率72.8%: MDR-TB耐药率为24.8%,其中初治耐药率为16.7%:复治耐药率为39.3%。②能够提取DNA的分枝杆菌临床分离株为413株,其中结核分枝杆菌409株(99.0%)。③70株MDR-MTB菌株中,rpoB基因、katG和inhA基因、gyrA基因、rrs基因的突变率分别是82.9%、65.7%、30.0%、15.7%。④46株MDR-MTB进行了MIC检测,发现9株XDR。   结论:①黑龙江省住院结核病患者对一线抗结核药总体耐药水平较高。总耐药率为59.7%,其中初治耐药率52.4%,复治耐药率72.8%: MDR-TB耐药率为24.8%,其中初治耐药率为16.7%:复治耐药率为39.3%。②其中,MDR-MTB菌株中rpoB基因总突变频率是82.9%,最常见的突变位点是531位(61.4%)和526位(1 5.7%)。katG和/nhA基因突变频率是65.7%,katG基因最常见的突变位点是S315T,突变频率为41.4%: inhA基因启动子区域基因最常见突变的是C-15T,突变频率为17.1%。gyrA基因总突变率为30.0%,最主要的氨基酸突变发生在读码框的94位及90位。rrs基因总突变率为15.7%,最常见的碱基突变为A1401G。③黑龙江省住院结核病患者MDR-MTB菌株中,有19.6%(9/46)为XDR-MTB。
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