儿科耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的临床分布特征及其耐药性传播机制研究

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目的:调查儿科临床分离的肺炎克雷伯菌对临床常见抗生素的耐药现状,探究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的临床分布特征与耐药性传播的机制,为临床合理用药和院感防控提供一定的实验依据。方法:对2009.09~2010.12期间我院患儿感染性标本分离的肺炎克雷伯菌采用VITEK全自动微生物分析仪结合鉴定卡鉴定,用药敏卡或结合K-B法做药敏试验和产超广谱p内酰胺酶(ESBLs)的检测。对分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌采用改良Hodge试验检测菌株碳青霉烯酶,采用EDTA协同法检测菌株金属酶,采用PCR扩增及核苷酸序列分析方法检测碳青霉烯酶耐药基因及相应基因型,采用质粒接合转移试验检测耐药菌株的传播特性,采用PFGE检测菌株克隆的同源性。结果:1419株非重复分离的革兰阴性杆菌中,检出肺炎克雷伯菌465株(32.77%),其主要分离自痰液标本,主要分布于监护病区和呼吸科。肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星和左氧氟沙星的敏感率高,分别为96.1%、98.7%、98.7%和95.3%。16株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌改良Hodge试验阳性率为35.7%, EDTA协同试验阳性率为100%,blaIMP基因阳性率为100%,经核苷酸序列分析确认均为blaIMP-4亚型;所有肺炎克雷伯菌株均未检出blaKPC、blaVIM、blaNDM-1和blaOXA-48基因。所有16株肺炎克雷伯菌的质粒接合转移试验结果均为阳性。16株肺炎克雷伯菌分为7种克隆株,其中A型克隆6株(含A1亚型克隆1株);B型克隆3株;C型克隆3株;D、E、F、G型克隆各1株。其中12株来自于监护病区,以A型克隆株流行为主,其次为B和C型。16例患儿中15例患有多种疾病伴呼吸道感染,1例为白血病伴血流感染,大多数病例采用美罗培南单用或与其他抗生素联用,16例患儿中有13例好转。结论:肺炎克雷伯菌占儿科临床检出革兰阴性杆菌的第二位。亚胺培南和美罗培南对肺炎克雷伯菌仍较为敏感,但已有部分耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌出现。产生IMP-4型金属酶是儿科临床肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类的主要的原因。blaIMP-4耐药基因的质粒传播及以A型为主的多克隆耐药株在多个儿科临床科室间的流行可能是导致本院肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药性传播的主要方式。这些细菌的耐药特征表现为对绝大部分包括碳青霉烯类在内的β内酰胺类抗生素耐药或敏感性降低,但其对阿米卡星、左氧氟沙星还保持较高的敏感率。临床应加强耐药及敏感性下降菌株的监测、建立有效的感染控制措施,以预防和控制耐药菌株的播散和流行。
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