蛋白泛素化修饰是一种在真核生物多种生理过程中发挥重要作用的翻译后修饰形式,是靠E3泛素连接酶对关键基因的精确识别来实现其功能的多样性和特异性。研究表明,在植物低磷胁迫应答相关的根系形态建成、磷吸收转运以及激素代谢等过程中蛋白泛素化修饰都发挥了非常重要的调控作用。本研究以橡胶树组培苗为材料构建了地上部地下部均一化酵母双杂交cDNA文库,以前期通过抑制差减杂交(SSH)获得的2个低磷胁迫应答相关的E3泛素连接酶基因HbSIN4T2、HbTIR1构建诱饵载体,并通过酵母双杂交技术分别筛选了互作蛋白。继而克隆获得互作蛋白的cDNA全长,并通过生物信息学对互作蛋白进行了分析,以期探索这些E3泛素连接酶基因在橡胶树低磷胁迫应答中的调控作用。主要的研究成果如下:1.构建了橡胶树地上部均一化cDNA文库,文库滴度8×107cfu/mL,所得文库插入片段≥0.5 kb的重组率为100%;2.构建了橡胶树地下部均一化cDNA文库,文库滴度7×107cfu/mL,所得文库插入片段≥0.5 kb的重组率为87%;3.构建了两个与低磷胁迫应答相关的E3泛素连接酶诱饵载体HbSIN4T2、HbTIR1;4.利用酵母双杂交技术,初步筛选到了 15个与HbSINAT2互作的阳性克隆,10个与HbTIR1互作的阳性克隆;5.分离获得了 4个与HbSINAT2互作蛋白的cDNA全长,分属结合蛋白、胁迫相关蛋白以及信号转导蛋白等6.分离获得了 5个与HbTIR1互作蛋白的cDNA全长,分属酶类、调控蛋白以及保守的假设蛋白等本研究结果表明,橡胶树HbSINAT2、HbTIR1与其互作蛋白可能参与了低磷胁迫下的激素代谢、信号传导以及生长发育等生理过程。