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目的:本实验以听力剥夺后的SD大鼠为研究对象，通过免疫组织化学的方法研究细胞色素C（Cyt-C）、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3型（Caspase3）、Caspase8在其听皮层的阳性表达，并利用实时定量多聚酶链式反应(Quantitativereal-timepolymerasechainreaction，RT-PCR)技术研究同源性蛋白酪氨酸磷酸酶2型（Src-homology2domaincontainingproteintyrosinephosphataseⅡtype，SHP-2）基因在其听皮层的表达情况，以期明确Cyt-C、Caspase3、Caspase8、SHP-2等凋亡蛋白酶在大鼠听力剥夺后听皮层的表达。
方法:选取生后2周龄的SPF级雄性SD大鼠48只，将其随机分为2周组、2周对照组、4周组、4周对照组、6周组、6周对照组、8周组、8周对照组，每组各6只。实验组动物实行双侧耳蜗损毁术，对照组未予手术干预。实验组动物术后行听性脑干反应(Auditorybrainstemresponse，ABR)测试，如双耳反应阈均在90分贝声压级(Decibelsoundpressurelevel，dBSPL)以上为听力剥夺造模成功。然后在相同条件下饲养各组动物至对应的时间点后，每组随机取3只大鼠的双侧大脑听皮层(n=6)用于免疫组织化学方法检测Cyt-C、Caspase3、Caspase8的表达，并在40×10倍的光学显微镜视野下，用彩色图像处理软件对棕色颗粒阳性细胞进行计数;剩余3只大鼠的双侧大脑听皮层(n=6)用于RT-PCR检测SHP-2基因的表达，并以2-△△CT法进行数据的相对定量分析。
结果:建立了稳定可靠的听力剥夺大鼠模型，ABR测试结果显示，造模手术后各实验组的双耳反应阈在95dBSPL均不能引出重复波形，双耳反应阈在造模手术前后的差异具有显著统计学意义(P＜0.01)。H&E染色和Nissl染色均在各实验组显示不等量的凋亡细胞，和对照组相比，各实验组的神经元细胞有不同程度的体积萎缩，颜色深染，胞浆、胞核窥视不清，核膜、核仁分界不明，细胞形态不一，或呈三角形，或呈梭形，或呈菱形，和正常的圆形细胞有明显差异，可见凋亡情况随时间加重。免疫组织化学方法检测出Cyt-C的阳性颗粒数在2周组为30.9±1.65，2周对照组为1.7±0.14，4周组为33.0±2.15，4周对照组为2.3±0.16，6周组为37.0±3.27，6周对照组为1.8±0.14，8周组为42.2±2.36，8周对照组为2.0±0.16;各实验组和同周龄的对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)，各实验组之间的差异也有统计学意义(P＜0.05)。Caspase3的阳性颗粒数在2周组为27.4±2.88，2周对照组为2.1±0.14，4周组为28.7±2.89，4周对照组为1.8±0.15，6周组为35.2±3.17，6周对照组为2.1±0.13，8周组为44.0±2.56，8周对照组为2.4±0.13;各实验组和同周龄的对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)，实验组的2周组和6周组，2周组和8周组，4周组和6周组，4周组和8周组，6周组和8周组之间的差异也有统计学意义(P＜0.05)。Caspase8的阳性颗粒数在2周组为28.4±2.08，2周对照组为1.9±0.16，4周组为29.3±2.08，4周对照组为2.0±0.15，6周组为37.4±1.73，6周对照组为2.3±0.18，8周组为40.2±2.22，8周对照组为2.1±0.17;各实验组和同周龄的对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)，实验组的2周组和6周组，2周组和8周组，4周组和6周组，4周组和8周组，6周组和8周组之间的差异也有统计学意义(P＜0.05)。RT-PCR结果显示，SHP-2基因的相对表达量（相对于对照组）在2周组为1.1±0.28，4周组为1.5±0.04，6周组为2.5±0.08，8周组为11.0±0.06;各实验组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)。
结论:双侧耳蜗切除术是建立听力剥夺动物模型的可靠方法，听力剥夺导致了听皮层神经元细胞的凋亡，产生了听觉中枢的可塑性。凋亡速度在4周以前相对较慢，6周以后相对较快。在凋亡发生发展的过程中，由SHP-2基因主导的正向调控力一直存在，并且和时间在一定程度上成正相关关系。