论文部分内容阅读
背景：
随着临床多药耐药、泛耐药菌株的日趋增多，利奈唑胺（Linezolid）已成为治疗革兰阳性菌及耐药革兰阳性菌感染的有效且相对安全的选择，然而在诸多的优势背后，利奈唑胺所致的血液毒性一直以来备受关注，在一定程度上限制了利奈唑胺的使用，国内外对利奈唑胺致血液学异常相关危险因素的报道多见，有文献指出过高浓度的暴露大大增加利奈唑胺的血液毒性风险，因此，如何通过监测血药浓度的同时防范利奈唑胺可能产生的血液毒性对临床安全使用利奈唑胺具有重大意义。
目的：
为更深入的了解利奈唑胺在临床应用早期对血常规指标的影响，以及利奈唑胺致血液毒性的临床相关危险因素等问题。本研究拟开展利奈唑胺使用早期的相关血液毒性研究，通过利奈唑胺血药浓度监测前提下分析利奈唑胺用药前与用药后血常规指标的变化情况，找出利奈唑胺用药早期发生血液毒性较为敏感的指标，并评估患者使用利奈唑胺致血红蛋白减少的相关危险因素，建立超高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定人血中血红素浓度进行关联分析，探讨利奈唑胺血药浓度与其血液毒性相关性。
方法：
1、利奈唑胺使用早期血液检查指标的分析：回顾性分析2016年1月至2018年10月入住我院使用利奈唑胺且行治疗药物监测(TDM)，谷浓度结果在6μg/mL以上的患者。通过电子病历系统对纳入患者的病例资料进行查阅统计，详细记录患者入院时临床基础特征、利奈唑胺用药情况、血常规、肝肾功能等化验指标数据，应用SPSS21.0统计软件进行组间分析患者使用利奈唑胺前与用药早期血常规项下指标值差异，找出随利奈唑胺血药浓度变化的敏感指标。
2、利奈唑胺致血红蛋白减少的危险因素分析：采用回顾性研究对使用利奈唑胺患者发生血红蛋白减少的观察指标进行单因素以及多因素逐步logistic回归分析，筛选利奈唑胺致血红蛋白减少的相关危险因素，并绘制ROC曲线预测临床发生特征。
3、建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中血红素的浓度：Water Acquity I-Class和Water XEVO TQ-S超高效液相三重四级杆质谱联用仪，采用ACQUITYUPLC?BEH C18(2.1mm×100mm，1.7μm)分离，色谱柱温度：40℃，流动相：5mm乙酸铵-0.1%甲酸（A）—乙腈（B），采用梯度洗脱，流速0.3mL/min，应用氟康唑为内标，乙腈沉淀血浆蛋白，涡旋振荡30s，低温高速离心5min，取上清液进样检测，进样量：1μL。
结果：
1、纳入有效病例105例，治疗期间监测血药浓度139例次，其中利奈唑胺血药浓度范围为6.05～38.89μg/mL，分析结果显示使用利奈唑胺前与用药期间具有统计学意义的指标为红细胞、血红蛋白、红细胞压积、淋巴百分数、中性粒细胞，与利奈唑胺血药浓度存在相关性的指标有单核细胞百分数、淋巴细胞百分数、嗜酸性粒绝对值、中性粒绝对值、红细胞、血红蛋白、红细胞压积。
2、采用单因素分析结果显示利奈唑胺致血红蛋白减少的相关危险因素为高ALT值、低血清白蛋白、接受连续肾脏替代疗法（CRRT）、糖尿病、谷浓度、疗程等，多因素Logistic回归分析显示利奈唑胺谷浓度是发生血红蛋白减少的重要危险因素，ROC曲线下面积0.669，临界值13.619μg/mL，对应切点灵敏度47.4%，特异性81.5%。
3、应用UPLC-MS/MS法测定氯化血红素浓度，氯化血红素与内标物质的色谱峰分离良好，未出现其他杂质峰干扰，氯化血红素的保留时间为1.93min，氟康唑保留时间为1.11min，氯化血红素线性范围为0.5～50μg/mL，最低定量限0.5μg/mL，低、中、高3个浓度质控样品日内精密度＜10%。
结论：
1、利奈唑胺用药早期与血药浓度具有相关性的指标为血红蛋白、红细胞、红细胞压积指标，较其余血常规项下指标更为敏感。
2、肝功能不全、重度肾功能不全的患者使用利奈唑胺时应加强血常规的监测频率，关注是否发生血红蛋白减少，利奈唑胺谷浓度对利奈唑胺致血红蛋白减少具有较高的预测价值，监测血药浓度可在易感人群中提高安全性。
3、UPLC-MS/MS法建立的血红素浓度的检测，操作简便，专属性强，可在测定利奈唑胺血药浓度的同时进行血红素的测定。
随着临床多药耐药、泛耐药菌株的日趋增多，利奈唑胺（Linezolid）已成为治疗革兰阳性菌及耐药革兰阳性菌感染的有效且相对安全的选择，然而在诸多的优势背后，利奈唑胺所致的血液毒性一直以来备受关注，在一定程度上限制了利奈唑胺的使用，国内外对利奈唑胺致血液学异常相关危险因素的报道多见，有文献指出过高浓度的暴露大大增加利奈唑胺的血液毒性风险，因此，如何通过监测血药浓度的同时防范利奈唑胺可能产生的血液毒性对临床安全使用利奈唑胺具有重大意义。
目的：
为更深入的了解利奈唑胺在临床应用早期对血常规指标的影响，以及利奈唑胺致血液毒性的临床相关危险因素等问题。本研究拟开展利奈唑胺使用早期的相关血液毒性研究，通过利奈唑胺血药浓度监测前提下分析利奈唑胺用药前与用药后血常规指标的变化情况，找出利奈唑胺用药早期发生血液毒性较为敏感的指标，并评估患者使用利奈唑胺致血红蛋白减少的相关危险因素，建立超高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定人血中血红素浓度进行关联分析，探讨利奈唑胺血药浓度与其血液毒性相关性。
方法：
1、利奈唑胺使用早期血液检查指标的分析：回顾性分析2016年1月至2018年10月入住我院使用利奈唑胺且行治疗药物监测(TDM)，谷浓度结果在6μg/mL以上的患者。通过电子病历系统对纳入患者的病例资料进行查阅统计，详细记录患者入院时临床基础特征、利奈唑胺用药情况、血常规、肝肾功能等化验指标数据，应用SPSS21.0统计软件进行组间分析患者使用利奈唑胺前与用药早期血常规项下指标值差异，找出随利奈唑胺血药浓度变化的敏感指标。
2、利奈唑胺致血红蛋白减少的危险因素分析：采用回顾性研究对使用利奈唑胺患者发生血红蛋白减少的观察指标进行单因素以及多因素逐步logistic回归分析，筛选利奈唑胺致血红蛋白减少的相关危险因素，并绘制ROC曲线预测临床发生特征。
3、建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中血红素的浓度：Water Acquity I-Class和Water XEVO TQ-S超高效液相三重四级杆质谱联用仪，采用ACQUITYUPLC?BEH C18(2.1mm×100mm，1.7μm)分离，色谱柱温度：40℃，流动相：5mm乙酸铵-0.1%甲酸（A）—乙腈（B），采用梯度洗脱，流速0.3mL/min，应用氟康唑为内标，乙腈沉淀血浆蛋白，涡旋振荡30s，低温高速离心5min，取上清液进样检测，进样量：1μL。
结果：
1、纳入有效病例105例，治疗期间监测血药浓度139例次，其中利奈唑胺血药浓度范围为6.05～38.89μg/mL，分析结果显示使用利奈唑胺前与用药期间具有统计学意义的指标为红细胞、血红蛋白、红细胞压积、淋巴百分数、中性粒细胞，与利奈唑胺血药浓度存在相关性的指标有单核细胞百分数、淋巴细胞百分数、嗜酸性粒绝对值、中性粒绝对值、红细胞、血红蛋白、红细胞压积。
2、采用单因素分析结果显示利奈唑胺致血红蛋白减少的相关危险因素为高ALT值、低血清白蛋白、接受连续肾脏替代疗法（CRRT）、糖尿病、谷浓度、疗程等，多因素Logistic回归分析显示利奈唑胺谷浓度是发生血红蛋白减少的重要危险因素，ROC曲线下面积0.669，临界值13.619μg/mL，对应切点灵敏度47.4%，特异性81.5%。
3、应用UPLC-MS/MS法测定氯化血红素浓度，氯化血红素与内标物质的色谱峰分离良好，未出现其他杂质峰干扰，氯化血红素的保留时间为1.93min，氟康唑保留时间为1.11min，氯化血红素线性范围为0.5～50μg/mL，最低定量限0.5μg/mL，低、中、高3个浓度质控样品日内精密度＜10%。
结论：
1、利奈唑胺用药早期与血药浓度具有相关性的指标为血红蛋白、红细胞、红细胞压积指标，较其余血常规项下指标更为敏感。
2、肝功能不全、重度肾功能不全的患者使用利奈唑胺时应加强血常规的监测频率，关注是否发生血红蛋白减少，利奈唑胺谷浓度对利奈唑胺致血红蛋白减少具有较高的预测价值，监测血药浓度可在易感人群中提高安全性。
3、UPLC-MS/MS法建立的血红素浓度的检测，操作简便，专属性强，可在测定利奈唑胺血药浓度的同时进行血红素的测定。