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他克莫司(Tacrolimus，FK506)是治疗免疫介导的炎性眼前段疾病的一种强力而有效的免疫抑制剂。然而，其水溶性差(3μg/mL)、生物利用度低，是限制FK506应用于眼科临床的主要障碍。为此，人们研究了许多新型FK506眼用制剂，如软膏剂、纳米粒、纳米乳、混悬液等，但其生物利用度仍未得到明显改善。目前，FK506眼用制剂在国内上市剂型为混悬液(Talymus?，日本千寿药业)，其药效较常规滴眼液有一定程度的提高，但仍然容易受到泪液冲刷而流失大量药物。因此，研发一种眼部高滞留FK506制剂是一个亟待解决的问题。本课题通过制备FK506阳离子微乳-原位凝胶(Cationic Nanoemulsion-based In-situ Gel，CNE GEL)解决了上述问题。
首先以蓖麻油(4%，w/v)、中链脂肪酸甘油酯(6%，w/v)作为混合油相，西他氯胺(0.02%，w/v)作为阳离子表面活性剂，吐温-80(1%，w/v)、泊洛沙姆188(0.1%，w/v)作为非离子表面活性剂，甘油(2.2%，w/v)作为渗透压调节剂，通过高压均质制得FK506CNE，并对其进行理化性质考察。结果显示，FK506CNE粒径为178.8±2.7nm，Zeta电位为21.4±0.6mV，PDI为0.18±0.03。
以26%泊洛沙姆407和12%泊洛沙姆188共同作为凝胶基质，将FK506CNE进一步制备成FK506CNEGEL。测得其加入模拟泪液前后的胶凝温度分别为31±0.17℃、35.7±0.26℃。对最优处方制得的FK506CNEGEL进行理化性质考察，测得其粒径为176.8±1.63nm，Zeta电位为21.3±0.26mV，pH值为7.42±0.09，符合眼用制剂要求。流变学结果表明，FK506CNEGEL具备适宜的胶凝温度和适宜的凝胶黏度。采用无膜溶出模型考察凝胶溶蚀及药物释放之间的关系，结果表明凝胶中药物的释放主要受凝胶溶蚀的影响。影响因素实验结果表明，FK506CNEGEL在4℃下稳定，但对光照、高温较敏感，应避光冷藏贮存。室温稳定性实验结果表明，FK506CNEGEL在室温下放置3个月其含量稍有降低，其他指标合格。
采用Draize眼部刺激试验评分表及眼组织病理切片(HE染色)进行刺激性评估，结果显示FK506CNEGEL与Talymus?及生理盐水对比，均对兔眼无明显刺激性。
采用小动物活体成像仪对FK506CNEGEL在SD大鼠眼部的滞留时间进行评估，结果显示FK506CNEGEL在大鼠眼部的荧光强度残留率高于自制CNE及市售处方制得的CNE(Cationorm?)，表明FK506CNEGEL在大鼠眼部滞留时间最长。
兔眼房水药动学研究显示，AUC(Talymus)为68.25±10.82ng·mL-1·h，AUC(CNE)为113.61±12.36ng·mL-1·h，AUC(CNE GEL)为128.34±13.09ng·mL-1·h，三者对比得AUC(CNE GEL)是AUC(CNE)的1.13倍，是AUC(Talymus)的1.88倍，表明FK506CNEGEL的生物利用度较另外两种制剂有所提高，展现出良好的眼部应用前景。
FK506CNEGEL是一种温度敏感型复合原位凝胶系统，能够有效延长药物在眼部的滞留时间，提高药物生物利用度。因此，其有望成为一种高滞留的FK506眼用制剂，为眼科临床提供一种新的治疗选择。
首先以蓖麻油(4%，w/v)、中链脂肪酸甘油酯(6%，w/v)作为混合油相，西他氯胺(0.02%，w/v)作为阳离子表面活性剂，吐温-80(1%，w/v)、泊洛沙姆188(0.1%，w/v)作为非离子表面活性剂，甘油(2.2%，w/v)作为渗透压调节剂，通过高压均质制得FK506CNE，并对其进行理化性质考察。结果显示，FK506CNE粒径为178.8±2.7nm，Zeta电位为21.4±0.6mV，PDI为0.18±0.03。
以26%泊洛沙姆407和12%泊洛沙姆188共同作为凝胶基质，将FK506CNE进一步制备成FK506CNEGEL。测得其加入模拟泪液前后的胶凝温度分别为31±0.17℃、35.7±0.26℃。对最优处方制得的FK506CNEGEL进行理化性质考察，测得其粒径为176.8±1.63nm，Zeta电位为21.3±0.26mV，pH值为7.42±0.09，符合眼用制剂要求。流变学结果表明，FK506CNEGEL具备适宜的胶凝温度和适宜的凝胶黏度。采用无膜溶出模型考察凝胶溶蚀及药物释放之间的关系，结果表明凝胶中药物的释放主要受凝胶溶蚀的影响。影响因素实验结果表明，FK506CNEGEL在4℃下稳定，但对光照、高温较敏感，应避光冷藏贮存。室温稳定性实验结果表明，FK506CNEGEL在室温下放置3个月其含量稍有降低，其他指标合格。
采用Draize眼部刺激试验评分表及眼组织病理切片(HE染色)进行刺激性评估，结果显示FK506CNEGEL与Talymus?及生理盐水对比，均对兔眼无明显刺激性。
采用小动物活体成像仪对FK506CNEGEL在SD大鼠眼部的滞留时间进行评估，结果显示FK506CNEGEL在大鼠眼部的荧光强度残留率高于自制CNE及市售处方制得的CNE(Cationorm?)，表明FK506CNEGEL在大鼠眼部滞留时间最长。
兔眼房水药动学研究显示，AUC(Talymus)为68.25±10.82ng·mL-1·h，AUC(CNE)为113.61±12.36ng·mL-1·h，AUC(CNE GEL)为128.34±13.09ng·mL-1·h，三者对比得AUC(CNE GEL)是AUC(CNE)的1.13倍，是AUC(Talymus)的1.88倍，表明FK506CNEGEL的生物利用度较另外两种制剂有所提高，展现出良好的眼部应用前景。
FK506CNEGEL是一种温度敏感型复合原位凝胶系统，能够有效延长药物在眼部的滞留时间，提高药物生物利用度。因此，其有望成为一种高滞留的FK506眼用制剂，为眼科临床提供一种新的治疗选择。