满山香子有效成分的提取与分离

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满山香为五味子科五味子属植物,广泛分布于我国广西和云南等省区的高寒山区,是上世纪后半期才发现的植物,云南民间代五味子药用。由于满山香含有大量保肝降酶、抗艾滋病毒、抗癌和PAF拮抗等活性成分,其研究日益受到重视。到目前为止,我们还没有查阅到有关满山香子化学成分的研究文献。为了更好地了解满山香,本文对满山香子的化学成分进行比较系统的研究。本论文主要由两部分组成。第一部分概述了五味子属植物的研究进展,主要包括对该属植物化学成分及药理作用的研究概况。第二部分是论文实验部分,为对满山香子化学成分的研究。满山香子经粉碎,用75%乙醇进行提取,提取物分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取。主要的分离、纯化过程如下:石油醚萃取物经硅胶柱层析分离,得到五个组份Fr.1, Fr.2, Fr.3, Fr.4和Fr.5。利用硅胶柱层析、制备薄层层析、重结晶法从Fr.1组份中分离得到化合物9、10、11和12;利用硅胶柱层析和制备薄层层析方法从Fr.2组份中分离得到化合物13。氯仿萃取物经硅胶柱层析分离,得到五个组份Fr.1, Fr.2, Fr.3, Fr.4和Fr.5。利用制备薄层层析和Sephadex LH-20柱层析,从组份Fr.1中分离得到化合物15和16;利用重结晶从组份Fr.2中分离到化合物17;利用硅胶柱层析从组份Fr.3中分离得到化合物14;利用硅胶柱层析、重结晶从组份Fr.4中分离得到化合物21和22;通过甲醇-氯仿洗脱从组份Fr.5纯化得到化合物18。乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离得到五个组份Fr.1, Fr.2, Fr.3, Fr.4和Fr.5。组份Fr.1经硅胶柱层析和制备薄层层析分离,得化合物3;组份Fr.2经硅胶柱层析、制备薄层层析和重结晶分离,得化合物1、4、5、6、7和8;组份Fr.3和Fr.4均经硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析分离,分别得化合物2和化合物19、20。正丁醇萃取物经D-101大孔树脂柱层析、硅胶柱层析和制备薄层层析纯化得化合物23。以上所有化合物的纯度采用薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)及测定熔点的方法检测,共从满山香子各部分萃取物中分离、纯化得到23个化合物。经过对其中15个化合物的1H NMR、13C NMR谱的解析,以及参考对照文献,确定了它们的结构。这些化合物分别为:β-谷甾醇(3)、柚皮素(4)、香草酸(5)、对苯二酚(6)、银杏双黄酮(7)、大黄素甲醚(9)、十六碳酸(11)、十八碳酸(12)、6-乙基-5-羟基-2,7-二甲氧基-1,4-萘醌(13)、乌苏酸(14)、水杨酸(17)、β-胡萝卜甙(18)、没食子酸(19)、杨梅素(20)和二十八烷(21)。化合物8和23是通过1H NMR、13C NMR、HMBC的解析,以及参考对照文献而确定,它们分别为水杨酸甲酯2-O-β-D-葡萄糖苷和水杨酸甲酯2-O-β-D-木吡喃糖基(1→6)-β-D-葡萄糖苷。通过对化合物15的UV、1H NMR、13C NMR、DEPT、H-H COSY、HSQC、HMBC、NOESY和MS等谱图的解析,确定其结构,检索SciFinder Scholar数据库,确定为新化合物,命名为4β,6α-二甲基-雅槛蓝-7(11),8(9)-二烯-12,13(4α,6α)-二内酯。余下的5个化合物的结构,尚需进一步做相关的测定。在分离得到的23个化合物中,确定了18个化合物的结构,除β-谷甾醇外,均为首次从该植物中分离得到。
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