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[背景和目的]缺血再灌注损伤后,外周CD4+T淋巴细胞大量浸润至脑实质并作用于固有小胶质细胞,与脑免疫炎症的发生发展及转归密切相关。不同亚群的CD4+T淋巴细胞介导不同的炎症效应,其中Th1/Th17介导促炎效应,而Th2/Treg亚群以抑炎效应为主。Fas/FasL表达于多种免疫细胞,参与细胞间炎症信号的相互传递。本文拟研究缺血性脑卒中后FasL对CD4+T淋巴细胞促炎/抑炎亚群分布及小胶质细胞表型和功能的调控,并进一步探讨对神经元凋亡的影响及相关分子机制。[方法]1、使用FasL突变(gld)鼠及B6鼠,建立右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。2、流式细胞技术检测活化CD4+T细胞及Th17细胞、Treg细胞水平及其比例;Q-PCR检测Th17及Treg细胞表型和功能标志物表达水平。3、LPS预处理小胶质细胞,两种基因型CD4+T细胞与小胶质细胞共培养后,检测小胶质细胞M1表型标志物(iNOS,TNF-α，CD16,CD32,CD86)和M2表型标志物(Ym-1/2,CD206，Arg-1)的变化,同时利用WB检测NF-κB信号通路的活化。4、体外培养神经元细胞,CD4+T细胞与小胶质细胞共培上清处理OGD后神经元,MTT检测神经元活性,WB检测凋亡通路Bax/Bcl-2蛋白表达。[结果]1、流式细胞术和Q-PCR结果提示在MCAO后24h和72h,gld小鼠的脑内、脾脏以及外周血中Th17/Treg细胞的比例下降。2、CD4+ T淋巴细胞与LPS预处理的小胶质细胞共培养后,与B6鼠相比,gld鼠CD4+T淋巴细胞-小胶质细胞的共培体系的炎症因子(iNOS、TNF-α)表达下降;此外,M1型小胶质细胞标志物CD32、CD86下调,而M2型标志物Ym1/2和CD206增加,且p65核转移减少;而当NF-κB信号通路被抑制后,iNOS、COX-2蛋白表达明显减少。3、与B6鼠相比,gld鼠CD4+T淋巴细胞-小胶质细胞的共培上清对OGD后神经元的损伤程度降低,且Bax/Bcl-2表达比例下降,标志着凋亡程度的减轻。[结论]缺血性脑卒中后,FasL突变通过调控外周CD4+T细胞亚群分布,减少Th17/Treg细胞比例,抑制NF-κB信号通路从而减弱了小胶质细胞的M1型极化,减轻缺血后神经元损伤和细胞凋亡。