As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc基因表达的影响

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目的观察三氧化二砷(As2O3)对NB4细胞垂体瘤转移基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)和C-myc基因表达的影响,为As2O3治疗APL提供新的试验依据。方法自苏州大学医学院购买人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株,精心培养,所有试验用细胞均为对数生长期细胞。分别用0.5、1.0、2.0μmo1/L的As2O3作用NB4细胞24h,48h,根据As2O3干预的时间和浓度不同分组,同时设立不加As2O3干预的NB4细胞组并选取SMMC-7721肝癌细胞系作为阳性对照组,每组均设三个复孔,收集各组别细胞用TRIzol法提取总RNA后立即进行RT-PCR,PCR产物在1%琼脂糖凝胶上电泳,凝胶电泳图像应用Biosens gel image analysis system进行PTTG和C-myc基因表达强度的半定量分析。结果未加As2O3的NB4细胞对照组和SMMC-7721肝癌细胞阳性对照组PTTG和C-myc基因的表达强度比较差异无显著性(P >0.05);0.5、1.0、2.0μmo1/L的As2O3作用NB4细胞24h,48h后PTTG基因的表达强度逐渐减弱,与未加As2O3的NB4细胞对照组比较差异有显著性(P <0.05)。C-myc基因的表达强度亦逐渐减弱,与未加As2O3干预的NB4对照组比较P <0.05。结论PTTG和C-myc在NB4细胞中也有高表达,提示PTTG和C-myc的高表达在急性早幼粒细胞白血病( acute promyelocytic leukemia,APL)发病过程中可能起着重要作用,As2O3的下调NB4细胞PTTG和C-myc的表达作用可能是其治疗APL的分子机制之一,其具体机制尚待进一步研究。
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