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细菌VI型分泌系统（Type VI Secretion System，T6SS）是近些年在革兰氏阴性细菌中发现的一类新的分泌系统。现有研究发现T6SS的功能包括致病性、抗致病性、细菌与细菌相互作用以及细菌的环境适应性等。本研究中，以模式动物病原细菌假结核耶尔森氏菌（Yersinia pseudotuberculosis）第四套VI型分泌系统（T6SS4）为研究对象。对其抗氧化胁迫功能及其调控机制进行研究，并对其抗氧化机制进行了初步解析。具体研究结果如下：1.通过对假结核耶尔森氏菌T6SS4启动子的分析，发现启动子区域含有抗氧化调控蛋白OxyR的结合位点，通过重组蛋白His6-OxyR和启动子区域进行体外EMSA实验，证明了OxyR与T6SS4的直接结合，DNase I足迹法确认了结合位点序列。使用LacZ报告基因检测野生菌株及oxyR突变菌株T6SS4表达差异，确定了OxyR对T6SS4的正调控作用，Western Blot实验也证实了OxyR对T6SS4的正调控。2.通过比较野生菌株、oxyR突变株及突变互补株在不同H2O2浓度下T6SS4的表达差异,我们发现在野生菌中T6SS4表达随H2O2浓度增加而提高,但在oxyR突变体中T6SS4表达水平无明显变化，突变互补株可恢复其表达水平。证明了T6SS4可被H2O2诱导表达且依赖OxyR。3.通过构建T6SS4核心基因clpV4、hcp4、vgrG4、icmF4的突变株，比较野生型与突变株在H2O2胁迫下的存活率差异，我们发现T6SS4突变体在氧化胁迫下存活率显著降低。并且通过HPF探针检测不同菌株在氧化胁迫条件下胞内羟基自由基含量及TUNEL检测氧化胁迫下细菌DNA损伤程度，我们发现T6SS4突变菌株在氧化胁迫下胞内羟基自由基含量和DNA损伤程度均明显高于野生菌株。4.通过比较野生菌株与T6SS4突变菌株在过氧化氢异丙苯、庆大霉素、联氨、镉和42℃热胁迫下细菌存活率差异，我们发现T6SS4突变菌株在多种初级和次级氧化胁迫下存活率明显降低，且突变互补株可恢复至野生水平。综上所述：本研究发现假结核耶尔森氏菌在受到初级或次级氧化胁迫时OxyR可感受氧化压力，结合于T6SS4启动子并促进T6SS4表达，从而减少氧化胁迫所产生的羟基自由基的形成和DNA损伤，以应对初级和次级氧化胁迫。