微囊藻毒素降解菌的筛选、鉴定及其降解活性研究

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本文以巢湖水体为研究对象,针对藻毒素的污染问题,做了较详细的研究。在蓝藻及其毒素的相关领域研究中,对藻毒素(Microcystins, MCs)纯品的需求有增无减。由于MCs在藻细胞内相对含量较少,干扰分离的物质多,且存在分离、纯化的成本较高等问题,使得建立快速、高效、低成本的MCs提取方法显得尤为重要。但一直以来,由于研究者的不同需要,MCs的提纯方法各有不同,至今也没有一种达成共识的最佳方法。对MCs的保存与提取,本实验从蓝藻保存、细胞破碎、提取MCs的溶剂系统、提取MCs的抽提时间几个方面做了改进。同时,对降解藻毒素高效菌的筛选、分离、鉴定及其降解藻毒素的效能与机理也展开了详细研究。本研究结果表明,此次采集的安徽巢湖天然水华蓝藻中所含的MCs存在有MC-RR和MC-LR,而且以MC-RR为主要类型。采用从巢湖水华蓝藻细胞中提取、提纯的MCs为微生物生长的唯一碳源和氮源,通过平板分离纯化,从巢湖底泥中分离出5株能够降解藻毒素的菌株,并对其中降解活性较高的一株(M9)进行生理生化和分子鉴定。结果表明,该菌为吉氏库特菌。为了进一步优化菌株M9对MCs的降解效能,本实验分别考察了以MCs为唯一碳、氮源条件下,外加碳氮源、金属离子、pH等因素对菌株M9降解MCs的影响,为富营养化水体中藻毒素的去除提供理论依据。结果表明,与对照相比,在外加10 g/L的甘油、外加1 g/L的硫酸铵、pH为7.0、外加Zn2等条件下,菌株M9的生长量和对MCs的降解率显著提高。用10 g/L的甘油作为外加碳源时,菌株M9降解MCs的能力最强,在3 d内MC-RR和MC-LR的最大降解率分别达到88.8%和79.5%,和对照相比,MC-RR和MC-LR的最大降解率分别提高了19.2%和19.0%。外加1 g/L的硫酸铵时,在3 d内MC-RR和MC-LR的最大降解率分别达到81.3%和79.9%,和对照相比,MC-RR和MC-LR的最大降解率分别提高10.3%和11.1%。说明营养元素强烈影响着MCs在巢湖水环境中的降解行为。在pH为7.0时,3 d内MC-RR和MC-LR的最大降解率分别达到53.6%和54.4%,和pH5.0时相比,MC-RR和MC-LR的最大降解率分别提高22.7%和15.3%。Zn2+和Fe3+对该菌株的生长有一定的促进作用,其中1 mg/L Zn2+的促进作用更显著,3 d内MC-RR和MC-LR的最大降解率分别达到52.4%和49.4%,和对照相比MC-RR和MC-LR的最大降解率分别提高23.0%和24.0%。
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