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目的:(1)研究miR-25-I(miRNA-25 inhibitor)对耐顺铂A549/DDP细胞株增殖、凋亡及对DDP耐药性的影响;(2)对miR-25-I作用机制进行研究;方法:培养人肺癌A549细胞株和耐顺铂的A549/DDP细胞株,检测DDP对两个细胞株作用的IC50值;转染miR-25-I至A549/DDP细胞内、提取细胞总RNA并以qPCR法评估mi R-25-I的转染效果;以抑制剂及NC(negative control)序列转染耐药A549/DDP细胞后,以CCK8法分别在转染24h,48h,72h时测定转染组、NC组及无处理组细胞的增殖抑制率,并以流式细胞仪检测转染抑制剂72h后三组细胞的凋亡率;设置转染抑制剂组及阴性对照组,以cck8法检测顺铂作用于两组细胞的IC50;以细胞爬片免疫细胞化学联合数字化病理扫描系统分析PTEN蛋白在转染抑制剂前后的表达情况,并以qPCR法检测转染抑制剂后PTEN mRNA的含量变化。结果:(1)A549细胞株的IC50为0.591μg/ml,95%可信区间为0.436μg/ml~0.753μg/ml;A549/DDP细胞的IC50为9.040μg/ml,95%可信区间6.504μg/ml~14.783μg/ml,A549/DDP的IC50是约为A549的15.29倍;(2)与阴性对照组及无处理组相比,转染miR-25-I的A549/DDP细胞内miR-25含量明显下降,其增殖受到明显抑制,凋亡率明显提高,且顺铂对转染抑制剂的A549/DDP细胞的增殖抑制作用也明显提高,其半数耐药浓度(IC50)下降,A549/DDP细胞的耐药倍数有所逆转;(3)细胞爬片免疫组化表达阳性灰度值分析及mRNA检测:抑制剂组的表达阳性部分平均灰度值为:139.7±2.52,NC组的表达阳性部分平均灰度值为:194±4.58,说明与NC组比较抑制剂组的A549/DDP的PTEN蛋白表达得到了较明显提高(t检验,P<0.05)。转染miR-25-I后细胞内PTEN mRNA含量的表达相比NC组(抑制剂组基因表达量:96.53±1.37;NC组:57.27±4.53,t检验,P<0.05)明显升高。结论:miR-25-I能够明显降低A549/DDP细胞的内源性miR-25的表达;抑制其增殖活力,增加其凋亡率,当与一定浓度DDP联合使用时,它可以提高A549/DDP细胞的对DDP的敏感性,逆转其耐药倍数,并且上述作用有与细胞内PTEN mRNA与PTEN蛋白的恢复性升高有关。