复方丹参片是药典方，功用活血化瘀止痛，主治血瘀型心绞痛，其发挥作用的药效物质基础和作用机理是本项研究的核心，它药效成分复杂不同于硝酸酯类作为一氧化氮的供体，是否通过促进体内自身的保护机制发挥作用。为此我们首先采用结扎冠脉大鼠的心肌缺血模型观察了复方丹参片量效关系，作为今后实验研究基线；另外采用高压液相色谱研究了丹参、三七及复方丹参方的指纹图谱，用于质量控制和指导药效学实验。最后采用经典缺血预处理的大鼠模型，以梗塞重量、心肌酶、心律失常的发生率、组织形态学、自由基为评价指标，观察复方丹参方预处理模拟和加强缺血预适应（IPC）对心肌缺血的保护作用，以及它对内源性保护物质iNOS、PKC、HSP70的mRNA和蛋白表达的影响。 1、复方丹参片抗大鼠心肌缺血作用的实验研究结果 大鼠结扎冠脉前降支21h后梗塞面积高达60.35％，LDH含量为2552.7±268.3u/l，明显高于对照组（745.6±219.8）和假手术组（1796.5±518.7），P＜0.01；用药后均有不同程度下降，不同剂量复方丹参片（剂量分别为1.04、2.08、4.13、6.24g/kg生药量）均可使梗塞面积缩小，但以4.13g/kg、2.08g/kg两个剂量为优，梗塞面积分别为18.30％、28.30％，显著低于模型组，P＜0.01；复方丹参滴丸、消心痛组分别为24.33％、24.67％，优于同等临床有效量的片剂。复方丹参片各组LDH呈现剂量依赖性，但均低于复方丹参滴丸和消心痛组。 结扎大鼠冠脉前降支后，各组ST段明显抬高，与假手术相比，P＜0.05，但各组间无明显差异。21h后ST段下降，下降的波幅以用药组明显，特别是消心痛组和复方丹参片6.24、4.13g/kg两个剂量组（分别为2.56±2.07、2.61±1.08、2.39±0.86mm），显著高于模型组（1.00±0.90mm），P＜0.05。 og 冠脉结扎后血浆SOD含量下降，使用复方丹参片、复方丹参滴 丸、消心痛后其含量均升高，上述各组与模型组相比均有显著差异， 但其中以片剂2．089八g组为优。血清中MDA iii：HH含量升高，用药 后均有下降趋势，各组间无显著性差异。 2、复方丹参方预处理加强缺血性预适应对·V顺护作用研究结 果显示 再灌组、早晚期假性预适应组坏死重量占缺血重量门S／AAR） 分别高达45儿47儿45儿。C率失常的发生率也分别高达76．46％、 55．560、73．33O；血清中mH含量也显著高于对照组，P＜0．01。 缺血预处理后，IPC早期组u八AR与早期假性预适应组相比降 低了17％，晚期PC组 m八M与晚期假性预适应组相比仅降低 4O；早期 IPC和晚期 IPC组心率失常发生率分别为 11．760、 43．75O，显著低于再灌和早晚期假性预适应组，P＜0．01；IPC后 LDH 释放也减少。说明缺血预处理可缩小缺血范围，减少。。率失常的发 生率。 复方丹参方预处理后，在再灌、IPC r上田 进一步缩小 约 10％一17％，LDH释放也减少，LDH含量以晚期药物＋IPC组最 低，与晚期假性预适应组相比 P＜0．05，但复方丹参方对，。率失常的 影响不明显。说明复方丹参方可模拟和加强 IPC的效应，但对早期 IPC的效应不及缺血预处理，而晚期PC效应不及复方丹参方预外 理。另外复方丹参方预处理后，还可以触清中MDA下降，＊OD活 性增强。 通过免疫组4匕和盯斗CR方法研究发现，复方丹参预处理后可以 使早、晚期rC组和再灌组的心肌细胞＊ OS、PKCmRNA和蛋白表达明 显增强，P叩．05，对再灌HSNO表达也有增加趋势，但无显著差异。 3、采用梯度洗脱的方法分离丹参的脂溶性部分和水溶性部分， 建立了高压测目色谱图条件，明确了止匕次实验中复方丹参方药效物 109 ①B 质，主要是水溶性原儿茶醛，丹参酸类，丹参素、三七皂旮类和冰 片。 结论：门）复方丹参片具有降低。。电图盯段、减少梗塞面积及 心肌酶的雕，降低血清中MDA含量，增加SOD活性等作用，综合各 项指标以 4．139从g有效剂量为优。且同等临床有效剂量片剂不及滴 丸，这说明复方的药效受有效成分的浓度和剂型影响。 门）复方丹参方可模拟和增强早晚期缺血预适应效应。其作用 机制主要是通眯高 SOD的活性，增强心 导型一肌氮合酶U NO S）和IPc毗反应关键环节－卡号传导物质P肛的邮NA和蛋白的表达 ，对HSP70表达?