酪蛋白磷酸肽—无定型磷酸钙对牙酸蚀症早期脱矿和牙釉质抗酸性的影响

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背景牙齿酸蚀症是指在无细菌参与的情况下,由化学因素引起的牙体硬组织的慢性、进行性丧失的疾病。其临床表现在开始阶段无自觉症状,随后会出现牙本质过敏症状,严重者出现牙本质和牙髓暴露甚至牙折。近年来,国内外大量的流行病学调查研究表明酸蚀症在人群中普遍存在,且发病率呈上升趋势,成为继龋病之后另一个危害口腔健康的疾病而受到广泛关注。随着酸性饮料消费的增加,酸性饮料成为牙酸蚀症的主要危险因素。在牙酸蚀症脱矿早期进行再矿化治疗能防止其进一步发展,并且能使脱矿釉质恢复到正常状态。氟化物是目前最经典再矿化制剂,然而使用过多却会带来一定的毒副作用,如氟牙症、氟骨症等。因此氟化物的应用受到一定限制,寻找一种无毒副作用的再矿化制剂成为研究的热点。酪蛋白磷酸肽(CPP)是以牛乳酪蛋白为原料,通过生物技术制得的具有生物活性的多肽,有很强的促钙吸收活性,它黏附在无定形磷酸钙(ACP)的表面形成毫微簇酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙复合体(CPP-ACP),稳定了高浓度的具有生物活性的钙、磷离子,有抑制牙釉质脱矿并促进再矿化的作用而受到广泛关注,是一种安全有效的,无毒副作用的制剂。综合大量国内外的研究发现,CPP-ACP有可能成为一种理想的氟的替代品用以防治牙酸蚀症。国内外对于CPP-ACP对恒牙及乳牙牙釉质抗酸性以及对酸性饮料造成的釉质早期脱矿影响的综合研究报道较少。因此对CPP-ACP用于牙酸蚀症防治以及在口腔领域中的应用还需进一步研究。目的本研究在参考国内外学者研究基础上,借鉴国外学者研究方法,以高浓度含氟制剂(氟保护漆含NaF5000ppm)做对比,通过表面显微硬度测量法和扫描电镜观察法研究CPP-ACP对恒牙及乳牙釉质抗酸性能的影响、CPP-ACP对酸性饮料造成的恒牙和乳牙釉质早期脱矿的影响,为牙酸蚀症早期防治提供一种新思路,也为CPP-ACP能否替代氟化物广泛应用于口腔领域提供初步科学依据。材料和方法1.CPP-ACP对酸性饮料造成的恒牙釉质早期脱矿的影响。收集临床拔除的第三磨牙制成牙釉质样本30个,完全随机分为3组(n=10):去离子水组(阴性对照组)、CPP-ACP组(实验组)、氟保护漆组(阳性对照组)。各组样本分别用可乐酸蚀,7次/d,2min/次,8h内完成,共7d,然后分别进行再矿化处理。去离子水组置于去离子水中,不做其他处理;CPP-ACP组和氟保护漆组分别用CPP-ACP和氟保护漆处理。分别在酸蚀前、酸蚀后和再矿化后用维氏显微硬度计测定釉质表面硬度并进行扫描电镜观察。2.CPP-ACP对恒牙釉质抗酸性能的影响。收集临床拔除的第三磨牙制成牙釉质样本30个,完全随机分为3组(n=10):去离子水组(阴性对照组)、CPP-ACP组、氟保护漆组(阳性对照组)。各组样本分别用以下制剂处理:去离子水和CPP-ACP(2次/d,3min/次,共7d)、氟保护漆(3min/次,只处理1次)。经过预处理后的各组釉质再用可乐酸蚀,7次/d,2min/次,8h内完成,共7d。各组样本分别在基线、再矿化制剂预处理后和可乐酸蚀后用维氏显微硬度计测定釉质表面硬度并用扫描电镜观察釉质酸蚀酸蚀后表面显微形态。3.CPP-ACP对乳牙釉质抗酸性和早期脱矿的影响。收集因乳牙滞留而拔除的乳下前牙,制备牙釉质样本30个,完全随机分为3组(n=10):A组(去离子水)、B组(酸蚀循环-CPP-ACP矿化处理)、C组(CPP-ACP预处理-酸蚀循环)。A组样本经历7天酸蚀循环后置于去离子水中,不做其他处理;B组样本经7天酸蚀循环后再经历7天CPP-ACP再矿化处理;C组样本经CPP-ACP预处理后再经历酸蚀循环。分别在基线、酸蚀循环后和CPP-ACP处理后用维氏显微硬度计测定釉质表面硬度并进行扫描电镜观察结果1.经可乐酸蚀后的恒牙釉质表面硬度值较酸蚀前有明显下降(P<0.05);经再矿化处理后,和氟保护漆组相比,CPP-ACP明显增加了酸蚀牙釉质表面显微硬度(P <0.05);扫描电镜观察结果显示:酸蚀牙釉质经CPP-ACP或氟保护漆处理后,釉质表面有矿物质沉积。2.3组釉质样本经7d矿化预处理后SMH均有升高,且CPP-ACP组SMH明显高于其余两组(P<0.05),再经过7d酸蚀处理后,CPP-ACP组SMH降低最少(P<0.05)。扫描电镜观察结果显示:经矿化预处理后釉质再经过酸蚀循环后,釉质都出现不同程度的脱矿,但CPP-ACP预处理釉质脱矿程度轻于去离子水组和氟保护漆组。3.各组样本SMH在实验最终都有降低(P<0.05)。和A组(去离子水组)相比,B组中,CPP-ACP明显增加了酸蚀牙釉质表面显微硬度(P <0.05);C组中,经CPP-ACP预处理后的牙釉质能减少表面显微硬度的降低(P <0.05)。各组样本在不同时刻的表面形态也不同。结论1.在体外实验中,CPP-ACP能促进钙盐沉积于脱矿恒牙釉质表面而提高酸蚀釉质的显微硬度,显著促进酸蚀釉质再矿化。2.单次使用氟保护漆并没有抑制恒牙釉质脱矿的作用,CPP-ACP能抑制恒釉质脱矿,增强牙釉质的抗酸性。3.CPP-ACP有抑制乳牙釉质脱矿和促进再矿化的作用。
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