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应激性溃疡(stress ulcer,SU)作为心身疾病的一种,随着生活压力的提高,其发病率亦出现不断上升的趋势,严重影响了人们的生活质量。应激性溃疡是由于机体在长期或者剧烈应激状态下引发的常见的胃肠道疾病之一,多伴有出血症状,同时可出现广泛的胃黏膜充血、水肿及多发性糜烂等,在治疗不及时或者认识不充分的情况下极易导致死亡,大面积的溃疡时可合并大出血,病死率可高达50%以上,是一种较为严重的急性胃黏膜病变。临床亦将之称为消化道急性应激性黏膜病变(acute stress mucosal lesion,ASML)。现代医学研究显示,应激性溃疡的发生与发展往往伴发睡眠障碍,可能与大脑皮层功能的失调、肾上腺皮质激素分泌旺盛等因素密切相关。古代中医病名无“胃溃疡”一词,按照其临床症状表现及特点可将其归纳到“胃脘痛”、“嘈杂”、“吐酸”等疾病范畴。同时古代中医已认识到脾胃功能的正常与否对于睡眠有着重要影响,《黄帝内经》提出“胃不和则卧不安”的观点,并在《素问·逆调论》对这种观点进行了详细阐述:“阳明者,胃脉也,胃者,六腑之海,其气亦下行,阳明逆不得从其道,故不得卧也。《下经》曰:胃不和则卧不安,此之谓也”。针灸治疗具有疏通经络、调和阴阳及扶正祛邪的作用,现代医学研究已经证实针灸对于免疫-内分泌系统具有重要调节作用,因此设计本实验以探究针刺对于应激性胃溃疡伴睡眠障碍大鼠睡眠时间的影响,并通过对应激性胃溃疡模型大鼠血清、脑组织中CRH、ACTH的测定探究针刺发生作用的具体机制,为临床治疗提供新的思路及手段。[目的]本课题从实验的角度,本实验通过束缚-浸水应激法复制大鼠应激性溃疡模型,以胃黏膜损伤指数(UI,ulcer index)评估大鼠胃黏膜损伤程度,造模后针刺组采用针刺中脘、足三里穴干预,药物组采用奥美拉唑药物干预,研究针刺对胃溃疡模型大鼠血清、脑组织中CRH、ACTH的影响,进一步讨论应激性胃溃疡与睡眠的相关性及针刺治疗对于其作用机制与效果。[方法](1)采用数字表法将28只雄性SD大鼠,分别是模型组、空白组、针刺组、药物组,每组7只。(2)空白组不予造模,其余3组均采取束缚-浸水(RWIS)造模法造应激性胃溃疡(stress ulcer,SU)大鼠模型,首次造模后第3天,除空白组外各组重复上述造模过程,加强造模效果。造模后第一天进行干预,针刺组针刺中脘、足三里穴,连续五天。药物组每日给予奥美拉唑肠溶片溶液2ml灌胃,连续五天。(3)采用行为学指标观察大鼠的自主活动和戊巴比妥钠诱导的睡眠时间,探究针刺对应激性溃疡大鼠模型自主活动和睡眠的影响。(4)采用Guth计分法,计算胃黏膜损伤指数在光镜下观察胃组织病理形态学改变,探究针刺对应激性溃疡大鼠损伤的作用。(5)运用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测大鼠血清CRH和ACTH、下丘脑CRH和垂体ACTH含量,探究针刺干预对应激性溃疡大鼠模型的效应机制。[结果](1)睡眠持续时间:与正常组相比,模型组大鼠睡眠时间显著缩短(P<0.05);与模型组相比,针刺治疗组大鼠睡眠时间显著延长(P<0.01);药物治疗组同模型组大鼠比较差异无统计学意义;针刺治疗组与药物治疗组大鼠比较,睡眠持续时间显著增加(P<0.05)。(2)胃黏膜溃疡指数评分:与空白组相比,模型组胃黏膜溃疡指数显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组和药物组胃黏膜溃疡指数明显降低(P<0.05);针刺治疗组与药物治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)胃黏膜肉眼下的形态学:正常组大鼠胃黏膜光滑完整,未见损伤性改变,模型组大鼠胃黏膜充血明显,有大量点状线状出血点和糜烂,损伤程度明显高于正常组,针刺治疗组和药物治疗组胃黏膜充血程度较模型组降低,点状线状出血点和糜烂变少。(4)胃黏膜光镜下的形态学:与正常组相比,模型组大鼠胃黏膜各层细胞排列紊乱,黏膜上皮缺损,腺体紊乱或被破坏,黏膜充血、水肿,可见大量红细胞渗出,胃黏膜细胞肿胀、细胞核坏死;与正常组相比,针刺治疗组:大部分胃黏膜结构较为正常,上皮较完整,红细胞渗出较少,偶见少量细胞坏死;与正常组相比,药物治疗组:胃黏膜结构基本完整,细胞轻度水肿,少量上皮细胞脱落、坏死,红细胞渗出较少。(5)分子生物学机制:①下丘脑CRH含量分析显示:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组含量显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);药物组含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);针刺组与药物组之间差异无统计学意义(P>0.05)。②血清CRH含量数据分析显示:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组含量显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);药物组含量降低,但无统计学差异(P>0.05);针刺组与药物组比较,针刺组含量较低,差异具有统计学意义(P<0.05)③垂体ACTH含量分析显示:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组、药物组含量降低,虽无统计学差异(P>0.05),但有下降趋势;针刺组与药物组之间差异无统计学意义(P>0.05)。④血清ACTH含量分析显示:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组含量显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01),药物组含量降低,但无统计学差异(P>0.05);针刺组与药物组比较,针刺组含量较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]1.针刺“中脘”、“足三里”能缩小溃疡面积,提高溃疡抑制率,保护胃黏膜。2.束缚-浸水应激造模后,大鼠戊巴比妥钠诱导的睡眠时间可明显缩短。3.胃溃疡会影响大鼠睡眠,而针刺对于改善睡眠质量有一定的效果。4.应激性胃溃疡的形成与CRH、ACTH含量升高有关,针刺可以有效进行干预,而且效果优于奥美拉唑药物。5.针刺能够提升SU大鼠溃疡抑制率和延长睡眠时间的作用机制,可能是通过降低中枢和外周CRH、ACTH的含量,使下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴得到调节,降低机体应激反应,从而治疗应激性胃溃疡。