nanos、5-HT和ERR基因在卤虫生殖过程中的表达特征与功能分析

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaohuzhao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
卤虫属于鳃足类小型甲壳动物,分布于高盐度内陆湖泊和沿海泻湖,其无节幼体是海洋甲壳类和鱼类幼体养殖阶段良好的活饵料,也是科学研究的理想材料。本研究利用孤雌卤虫转录组文库并结合文献查找,筛选得到与卤虫生殖相关的基因nanos、5-HT和ERR,并进行生物信息学分析。采用q PCR技术研究其在孤雌卤虫脑部、卵巢系统和躯干组织中的表达量以及在卵巢系统组织不同发育时期表达特征,并利用RNAi显微注射技术通过敲降基因探究其功能,再结合蛋白印迹技术分析基因敲降后的蛋白表达特征。主要结果如下:结合孤雌卤虫转录组文库和测序技术,得到了生殖相关基因nanos、5-HT和ERR的完整的开发阅读框(ORF)片段长度,分别为933 bp、1242 bp和1536 bp。通过对其蛋白结构域预测得到:nanos在232-279位氨基酸包含zf-nanos结构域;5-HT在32-371位氨基酸处有一个7tm A_5-HT7的功能结构域,属于G蛋白偶联受体;ERR包含一个锌指结构域和HOLI结构域。对这三个基因进行生物信息学分析,发现nanos属于稳定的碱性亲水性蛋白,5-HT和ERR属于稳定的酸性疏水性蛋白。q PCR分析发现,卤虫胚胎发育早期,nanos在卵巢系统组织中表达量最高,在脑部和躯干组织中基本上没有表达;5-HT在脑部组织中表达量最高,并且随着卤虫发育进程,5-HT在各组织中的表达特征基本上没有变化;ERR在脑部组织中表达量最高,随着卤虫发育进程,在孤雌卤虫胚胎发育晚期,ERR在卵巢系统组织中的基因相对表达量高于脑部组织和躯干组织,无组织、器官的特异性表达。另外对卵巢系统组织不同发育阶段相关基因表达特征进行分析可知,nanos、5-HT和ERR在四个发育时期中普遍表达。nanos在卵黄发育晚期表达量最高,5-HT和ERR在胚胎发育早期表达量最高,且先上升后下降的趋势为三个基因的共同表达特征。利用RNA干扰技术,敲降了nanos和5-HT的mRNA表达水平后,发现其蛋白水平也相应的降低。对其子一代的数量进行统计发现,nanos和5-HT干扰组子一代数量显著少于对照组EGFP的子一代数量,繁殖模式也发生了明显的改变,以卵胎生(产幼体)方式繁殖的卤虫比例多于卵生繁殖的卤虫。基因敲降后卤虫无节幼体的正常发育并未受到影响,形态与对照组幼体相似,未发现畸形或突变。利用组织切片技术对注射后卵黄发育晚期和胚胎发育晚期的卵巢系统组织进行分析,发现干扰组的卵子出现了形状不规则和卵黄蛋白原合成受到抑制的现象,这可能会导致后代不能正常产出,与干扰组子一代总数量显著低于对照组的情况相吻合。
其他文献
镁硼酸盐因其优越的性能被广泛应用于搪瓷、电池制造、医药、贵金属加工、航空航天等诸多生活和工业领域。我国青藏高原盐湖卤水液体硼矿资源丰富,但由于硼酸盐结构复杂多样,且在水溶液中存在过饱和现象等问题,这严重阻碍了镁硼酸盐大规模生产。因此,本论文主要开展对液体镁硼酸盐热力学性质研究,并根据Pitzer离子相互作用模型,计算获得镁硼单盐和混合离子作用参数,为含硼酸盐盐湖资源的有效利用提供重要的热力学基础数
学位
南美白对虾因其营养丰富、壳薄肉厚味美而受到消费者青睐,但因蛋白质和水分含量高使其在捕捞销售及贮运的过程中极易受到细菌的侵袭而腐败变质,这严重降低了对虾的营养价值和经济价值。为此,科技人员研发了各种保鲜技术。但目前的保鲜技术或因化学残留、或因技术复杂而存在一些缺陷。柚子皮在日常生活中常被当作废弃物丢掉,有研究表明柚子皮具有抗菌、抗氧化的功能。本文研究了柚子皮挥发性物质对冷藏南美白对虾的保鲜效果,用1
学位
虾类是地球上已知分布最广泛的甲壳动物,在维护生态环境和发展国民经济中发挥着举足轻重的作用,因此解析无脊椎动物先天免疫机制、提高其免疫稳态对于稳定无脊椎动物种群和提供人类所需优质蛋白十分重要。克氏原螯虾(Procambarus clarkii)是我国新兴的养殖品种,但在养殖规模不断扩大的趋势下需关注病害问题所带来的经济损失。本团队前期研究分离得到一株高效积累聚羟基丁酸酯(poly-hydroxybu
学位
环境激素(也称环境内分泌干扰物)对机体正常的激素水平具有干扰作用,对人类健康具有潜在威胁。壬基酚(Nonylphenol,NP)和双酚A(Bisphenol A,BPA)是两种常见的环境激素,由于二者极易在海洋生物中富集并通过食物链进行传递,近年来引起了人们的广泛关注。本研究探究了不同浓度的NP和BPA对小球藻(Chlorella pyrenoidosa)生长(细胞密度和叶绿素a含量)、光合活性(
学位
二甲基硫(DMS)是一种主要由海洋生物产生的挥发性硫化物,能够调节全球气候变化。未来气候变化也会通过改变黄东海物理生态环境间接影响黄东海DMS。研究黄东海DMS浓度及其海-气通量的未来变化,对于理解黄东海DMS对未来气候变化的响应具有重要作用,可为应对气候变化提供科学支撑。本文利用CORDEX-EA当前(2000~2009年)与RCP4.5情景下未来(2041~2050年)平均气候态结果,驱动黄东
学位
在我国台风风暴潮多见于夏秋季节台风鼎盛时期,主要影响作用于东南沿海,相比于温带风暴潮,其引发的风暴潮增水往往更为剧烈。风暴潮是中国沿海最严重的自然灾害,其发生频率、强度受到气候变化的影响。本文旨在分析在气候变化的背景下中国沿海台风风暴潮的变化特征和其对气候变化的响应机制。利用我国东南沿海地区9个台站自1958年的逐时水位数据,通过调和分析得到天文潮位和风暴潮增水。发现我国沿海天文潮的振幅和迟角呈现
学位
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是目前世界养殖产量最高的对虾之一,具有生长周期短、繁殖力强、成活率高、抗逆性强、便于运输等优点,产生了很大的经济效益和社会效益。然而对虾的病害问题不容忽视,对虾急性肝胰腺坏死病、对虾白斑综合征、对虾传染性皮下及造血组织坏死病、对虾白便病、对虾肝肠胞虫早期死亡综合征等,给对虾养殖业造成了重大经济损失,因此寻找绿色高效药物,成为凡纳滨对虾病害防治的
学位
本论文选取钙化颗石藻Chrysotila dentata与非钙化颗石藻Emiliania huxleyi为研究对象,研究在全球气候变化下海洋中双重环境因子的交互作用对颗石藻的生理学影响。本研究采取了一系列实验室内半连续培养的方法,选取二氧化碳浓度环境因子分别与温度、光照强度两种环境因子交互。实验设置二氧化碳浓度与温度处理如下:p CO2 400 ppm、p CO2 800 ppm+(10℃、15℃
学位
目的 观察丁苯酞软胶囊联合胞磷胆碱治疗脑梗死后血管性痴呆(VD)患者的疗效。方法 62例脑梗死后VD患者随机分为对照组和观察组,两组均接受常规治疗,对照组加用胞磷胆碱治疗,观察组加用胞磷胆碱和丁苯酞软胶囊治疗,连续治疗3个月。比较两组治疗效果。结果 观察组疗效明显优于对照组,蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分、血流量和血流速明显升高,临床痴呆评定量表(CDR)评分、脑血管床特性阻抗和外周阻力明显
期刊
浮游动物是海洋生态系统的重要组成部分,在海洋物质循环中起着承上启下的“泵”作用,通过捕食者与被捕食者之间的关系发挥作用。为了解渤海湾浮游动物在海洋生态系统物质循环和能量流动中的作用,本研究对2020年夏季(7月至8月)和秋季(10月至11月)对渤海湾海域(117°72′-119°14′E和37°98′-139°98′N)开展水文、化学以及生物等海洋综合调查,夏季和秋季分别设置了17和19个采样站位
学位