【摘 要】
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目的:探讨日本血吸虫染色体制备和细胞体外培养条件,并分析培养细胞的生物学特性.方法:1.采用20 μg/ml的秋水仙素处理童虫,制备染色体标本并进行G带显带,然后对其染色体核型
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目的:探讨日本血吸虫染色体制备和细胞体外培养条件,并分析培养细胞的生物学特性.方法:1.采用20 μg/ml的秋水仙素处理童虫,制备染色体标本并进行G带显带,然后对其染色体核型及G带带型进行分析;2.选取5种促进细胞增殖的因子,采用正交设计,配制16种条件培养基,对18d Sj童虫细胞进行体外培养,比较观察细胞的增殖能力,直观分析细胞AKP的检测结果;3.用改良RPMI-1640培基对Sj尾蚴细胞进行原代和传代培养,用HE染色和扫描电镜观察细胞一般形态和超微结构,用SDS-PAGE和ELISA法分析其抗原组分,用免疫荧光法和凝集试验检测其抗原性.结果:1.日本血吸虫染色体2n=16,2号为性染色体,核型公式为2n=6st+8sm+2m,各对染色体均显示出各自特征性G带带型;2.对组织细胞增殖相观察和AKP(％)的直观分析结果表明,促进细胞增殖的最佳组合为转铁蛋白,单核苷酸和b-FGF;3.尾蚴细胞形态观察表明,其平均大小为3.5μM直径,最小仅1μM直径;HE染色后,细胞呈高核质比率,少数胞浆较丰富;扫描电镜下,有的细胞表面布满细小微绒毛,有的呈乳突样突起,凹窝及小孔,有的胞质形成皱折和突起;原代与传代培养细胞抗原组分存在差异,其传代细胞能与抗尾蚴血清发生特异性反应.结论:1.为血吸虫培养细胞鉴定提供了染色体核型及其G带带型分析的方法:2.证明转铁蛋白,核苷酸和b-FGF对Sj童虫细胞增殖具有明显促进作用:3.对Sj尾蚴细胞培养获得传代结果,并初步鉴定了培养细胞的形态学特征,证明尾蚴传代细胞具有免疫学应用价值.
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