多囊卵巢综合征(PCOS)是最为常见的多因素内分泌紊乱疾病,其病因尚不能确定。高雄激素血症是该疾病的诊断标准之一,是导致临床表型以及造成不育的主要原因。体内雄激素合成增多或是雄激素向雌激素转化减少都可导致体内雄激素异常升高。雄激素转化为雌激素被称为芳香化,芳香化酶是芳香化的限速酶,它由CYP19A1编码,在颗粒细胞中的表达受卵巢特异的启动子调控,其表达水平受多种因素影响。已知类固醇生成因子(Steroidogenic Factor-1,SF-1)可以结合在CYP19A1基因启动子上正向调控其转录活性。有研究显示,SF1表达水平异常降低参与女性不育和子宫内膜异位症的发生发展,且该基因的异常表达受其自身甲基化调节,但引发SF1基因甲基化的原因不明。双酚A(Bisphenol A,BPA)是一种类雌激素物质,是内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals,EDCs)的一种。已有研究显示,双酚A在PCOS患者的血液,尿液以及卵泡液当中的含量明显高于非PCOS患者,并且与睾酮以及雄烯二酮的含量正相关。双酚A还可以下调CYP19A1以及芳香化酶的表达。此外,包括双酚A在内的环境内分泌干扰物不仅可通过经典的雌激素/雄激素受体介导的信号通路影响调控代谢以及生殖的激素的正常作用,还可造成包括DNA甲基化在内的表观遗传改变。本研究旨在利用KGN细胞系,探讨双酚A是否能够通过改变SF1基因启动子的甲基化抑制SF1表达,进而下调CYP19A1基因转录活性和蛋白水平,抑制颗粒细胞中雄激素向雌激素的正常转化。为了证实我们的研究假设,我们进行了以下实验。RT-PCR,Western Blot实验结果显示,双酚A处理细胞后,CYP19A1和SF1的mRNA水平以及芳香化酶蛋白水平均下降。此外,MSP实验证实双酚A可以升高SF1基因的甲基化水平。干扰SF1后,由双酚A造成的CYP19A1和芳香化酶的降低均有所缓解。我们还使用放射性免疫技术检测了 KGN细胞系培养液上清中雌二醇的含量,结果表明在双酚A的影响下,上清液中雌二醇与睾酮的比值下降;随后过表达SF1,这种现象被部分逆转。为了在临床样本中验证我们在细胞系中发现的雄激素转化异常现象是否也存在于PCOS患者中,实验室收集了 PCOS患者的卵巢颗粒细胞,RT-PCR实验检测颗粒细胞中CYP19A1和SF1mRNA的表达,结果发现在PCOS患者中这两种基因的转录水平均下降,MSP实验证实SF1甲基化水平在PCOS患者中增高。双酚A通过升高SF1的甲基化水平来影响颗粒细胞中的雄激素转录且这一机制在我们收集的临床病例中得到证实。这可能是高雄激素血症的原因之一并可能最终促进了多囊卵巢综合征的发生发展。我们的研究为探讨多囊卵巢综合征致病机制提供了一个新的思路,同时为该疾病的治疗与用药提供了一个潜在的靶点。