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目的：1、建立富集舌癌干细胞的动物模型，解决舌癌干细胞研究中因癌干细胞数量少所致的瓶颈问题。2、检测Tca8113细胞系癌干细胞标志的表达情况,为从细胞系中分离舌癌干细胞提供前期实验依据。方法：选取舌癌Tca-8113细胞系为研究对象,以化疗药物干预为基本手段,采用裸鼠体内微环境建立富集舌癌干细胞模式,主要构建模式如下：建立舌癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,采用裸鼠腋窝皮下注射癌细胞,并将荷瘤鼠随机分为对照组和实验组,对照组不予化疗药物干预,只按相同方式注射等量生理盐水,实验组给予低剂量化疗富集舌癌干细胞,采用环磷酰胺腹腔注射,剂量100mg/kg,8天为一个周期,连续注射3天,停药5天,肿瘤最大直径达1.5cm时取材原代培养,并在体连续反复传代5次,分别命名为Tca-8113/CTX P1+～Tca-8113/CTX P5+,评价各代的体内成瘤能力,同时用球囊形成率来证实经环磷酰胺富集的舌癌细胞中癌干细胞的比率,最后通过实时荧光RT-PCR方法检测干细胞标志Oct4的mRNA表达。结果：在裸鼠两侧腋窝皮下注射Tca-8113亲代细胞后,成瘤率为100%,形成的异种移植瘤体内反复连续传代5次,同时给予低剂量化疗压力。1至5代Tca-8113细胞的成瘤时间分别是11、9、7、7、5天,体内成瘤能力逐步增强,利用100mg/Kg环磷酰胺富集的第五代舌癌细胞的体内成瘤能力最强；而1～5代肿瘤细胞在体内的生长速度也大致呈递增趋势。在球囊形成实验中,第1、2、3代细胞TCA-8113/CTX P1+、TCA-8113/CTX P2+、TCA-8113/CTX P3+细胞在第3天开始逐渐皱缩、死亡,只有第4、第5代细胞能形成“球囊”,球囊形成率分别为：(8.25±3.41)%,(11.23±4.47)%,n=3,并表达出较强的“干性”,通过对第4、第5代细胞Oct-4基因的mRNA进行检测,其表达显著增加,第5代(Tca-8113/CTX P5)的Oct4基因mRNA水平最高,显著高于对照组(P<0.05)。结论：裸鼠皮下移植瘤传代联合环磷酰胺干预模式,可有效富集舌癌细胞系Tca-8113细胞中癌干细胞特性细胞群,在体内成瘤能力的比较中逐代增强；Oct-4基因很有可能是舌癌干细胞特异性标志之一。