目的：胶质瘤是中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤，特别是胶质母细胞瘤的术后复发率高，五年生存率低。它是一种富含血管的恶性肿瘤，且具有浸润性生长的特点，血管的生成有利于肿瘤的生长、侵袭和转移。侵袭性生长是脑胶质瘤细胞疗效差的主要原因之一，而新生血管是肿瘤侵袭性生长过程中的必然现象。故研究胶质瘤发生、发展、侵袭和转移的特征有着积极的现实意义。肿瘤的生长、侵袭和转移依赖于肿瘤性的血管生成。而肿瘤的血管生成又受血管生成促进因子和血管生成抑制因子的共同调节。促血管生成素AngiopoietiFns(Angs)是近年发现的与血管生成有关的因子，包括Ang-1，Ang-2，Ang-3，Ang-4等，其中Ang2与血管内皮细胞生长因子(VEGF)有协同作用，在肿瘤血管生成中起着至关重要的作用。胶质瘤是典型的血管依赖性实体肿瘤。因此研究Ang-2和VEGF相关的分子生物学机制，可以为治疗脑胶质瘤提供新思路。本研究的目的是通过对脑胶质瘤中Ang-2、VEGF及微血管密度(MVD)进行检测，探讨它们之间的关系及在胶质瘤生长、侵袭和转移中的作用及与胶质瘤恶性程度与预后的关系。 方法：选取2003年～2004年于河北医科大学第二附属医院神经外科行脑胶质瘤手术切除的新鲜胶质瘤标本49例，其中男性患者27例，女性22例。年龄6-76岁，平均45.2±11.7岁。其中＜60岁者35例，＞60岁者14例。临床症状出现时间5天～2年，平均两个月。所有患者术前均未行化疗、放疗及免疫治疗。肿瘤临床病理按WHO(2000)神经系统肿瘤分类标准进行分类和分级，其中Ⅰ级10例(毛细胞性星形细胞瘤8例，脉络丛乳头状瘤2例)；Ⅱ级9例(纤维性星形细胞瘤4例，原浆性星形细胞瘤2例，少枝胶质细胞瘤2例，肥胖细胞性星形细胞瘤1例)；Ⅲ级13例(间变性星形细胞瘤11例，间变性室管膜瘤2例)；Ⅳ级17例(胶质母细胞瘤12例，髓母细胞瘤5例)。另取5例取自同期因急性颅脑损伤行内减压手术的正常脑组织作为对照，其中男3例，女2例。每例标本均分为两部分：一部分于术中离体30分钟内取材，立即置入液氮速冻，并保存于-80℃冰箱，用于RT-PCR；另一部分标本均用4％多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，用于免疫组织化学染色。每例标本做5μm厚连续切片备用，并做HE染色确定诊断。 免疫组织化学染色法检测蛋白水平的表达：应用S-P免疫组织化学方法检测促血管生成素-2、VEGF及微血管密度(Mcrovasculardensity,MVD)，每种免疫组化染色均设阳性和阴性对照。结果判定促血管生成素-2阳性染色均定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞质中，阳性细胞成不均散分布。VEGF表达在胶质瘤细胞质中，呈棕黄色，不均散分布。以高倍视野(×400)下阳性细胞数量综合判断，采用半定量分析法。每张切片随机选择5个以上高倍视野，镜下视野清晰，无坏死、出血，计数1000个肿瘤细胞的阳性率。每个玻片计数1000个肿瘤细胞，求出阳性细胞百分数，用标记指数(Labellingindex，LI)表示：LI(％)=阳性细胞数/计数细胞数×100％。同时分别将阳性肿瘤细胞分为4个等级：无阳性细胞为“-”；阳性细胞＜30％为“+”；阳性细胞30％～60％为“++”；阳性细胞＞60％为“+++”。 所有结果应用SPSS11.5软件包进行统计处理，mRNA表达指数(RI)及标记指数(LI)用均数±标准差(X±S)表示。对结果采用t检验，方差分析，卡方检验，秩和检验及直线回归及相关分析等方法。检验标准采用p＜0.05有统计学意义。 结果：本实验共检测了胶质瘤49例，正常脑组织5例作为对照，Ang-2、VEGF、MVD在正常脑组织及不同恶性度胶质瘤中的表达以及它们之间的相关性如下： 1Ang-2阳性染色均定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞质和胞核中，其中大部分在胞核表达，Ang-2蛋白在49例胶质瘤中均有表达，5例正常脑组织中Ang-2蛋白无阳性；在10例Ⅰ级胶质瘤中Ang-2蛋白阳性肿瘤细胞的百分率均数为0.1788±0.0108；在9例Ⅱ级胶质瘤中Ang-2蛋白阳性肿瘤细胞的百分率均数为0.2202±0.0083；在13例Ⅲ级胶质瘤中Ang-2蛋白阳性肿瘤细胞的百分率均数为0.2809±0.0107；17例Ⅳ级胶质瘤中Ang-2蛋白阳性肿瘤细胞的百分率均数为0.3536±0.0068。且在高度恶性胶质瘤中Ang-2蛋白在肿瘤与正常脑组织交界处，肿瘤内坏死组织周围高表达，两者周围区低表达。由此可见胶质瘤组织中Ang-2阳性蛋白表达率明显高于正常脑组织，且在恶性度高的胶质瘤明显高于低度恶性的胶质瘤中的表达率。经统计学X2检验分析其差别非常有显著性P＜0.01。 2VEGF表达与胶质瘤细胞质中，5例正常脑组织无VEGF表达VEGF表达阳性率为0.0895±0.0085，10例Ⅰ级胶质瘤中VEGF表达阳性率0.1812±0.0078，9例Ⅱ级胶质瘤中VEGF表达阳性率0.2302±0.0087，13例Ⅲ级胶质瘤中VEGF表达阳性率0.3491±0.0079，17例Ⅳ级胶质瘤中VEGF表达阳性率0.4377±0.0146。胶质瘤VEGF阳性表达率显著高于正常脑组织，其表达在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各级胶质瘤之间有显著差异性，经统计学X2检验分析其差别非常有显著性P＜0.01。 3经过微血管密度测定，正常脑组织和肿瘤组织间质中的血管内皮细胞均有Ⅷ因子相关抗原表达，正常脑组织中微血管数量较少，形态规则，而肿瘤组织中微血管数量较多，形态不规则。检测得到5例正常脑组织的MVD为6.2±1.5，10例Ⅰ级胶质瘤的MVD为13.4±1.6，9例Ⅱ级胶质瘤的MVD为29.02±1.8，13例Ⅲ级胶质瘤的MVD为48.2±1.2，17例Ⅳ级胶质瘤的MVD为80.0±2.0。正常脑组织、Ⅰ到Ⅳ级胶质瘤中MVD逐渐增高，经检验差异显著P＜0.01。 4Ang-2、VEGF、MVD的相关性正常脑组织中Ang-2、VEGF、MVD不表达或者弱表达，所有胶质瘤中，随着胶质瘤级别的升高，它们的阳性表达水平明显升高。Ang-2表达与VEGF表达及MVD密切相关(p＜0.01)，Ang-2、VEGF、MVD在正常脑组织与不同级别的胶质瘤中的阳性表达率呈显著正相关。 结论：Ang-2、VEGF和MVD的表达均随着胶质瘤病理级别的增高而增加，VEGF的表达与MVD及Ang-2的表达均呈正相关。VEGF、Ang-2与胶质瘤血管密度及胶质瘤的恶性度呈密切正相关,VEGF.MVD及Ang-2均可作为反映胶质瘤恶性程度的指标。由此推测，VEGF、Ang-2是脑胶质瘤中一种重要的促进肿瘤血管生长的因子，它在胶质瘤组织的生长、侵袭和转移中起着非常重要的作用。