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目的以桔梗为原料,提取桔梗中的多糖、分离纯化得到纯净的桔梗多糖,然后对其结构进行硒化修饰,并对硒化工艺进行了研究,在此基础上考察它们的生物活性并进行比较。方法采用超临界CO2萃取技术辅助水提醇沉的方法提取桔梗中的多糖,以桔梗多糖的收率和多糖的含量为指标,采用正交设计优化超临界CO2方法萃取的工艺条件;利用DEAE-52纤维素柱和葡聚糖凝胶纯化后再用SephadexG-75层析柱进行二次纯化。以桔梗多糖为原料,在硝酸催化剂的作用下加入亚硒酸钠,使桔梗多糖与亚硒酸钠反应,生成有机硒化物(桔梗硒多糖),用HPLC法检测有机硒化物的硒含量,以桔梗硒多糖的产率和硒含量为指标,确定其桔梗硒多糖合成的最佳工艺。采用邻苯三酚自氧化法测定桔梗多糖和桔梗硒多糖对超氧阴离子自由基的清除作用,水杨酸法测定羟自由基清除作用,HPLC法测定DPPH浓度评价对DPPH自由基的清除作用,并与维生素C进行了比较,考察其抗氧化活性。以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过UV-vis法对硝基酚的测定,考察桔梗多糖和桔梗硒多糖对α-葡萄糖苷酶活性的影响,并且确定其抑制类型。用昆明种小鼠(SPF级)48只分成6组,即正常组(空白组)、模型组、阳性组(联苯双脂组)、桔梗硒多糖低、中、高剂量组,每组8只。正常饲养一周后,桔梗硒多糖低、中、高剂量组,连续灌胃给药14 d,高剂量组给药2.0 g·kg-1,中剂量组给药1.0 g·kg-1,低剂量组0.5 g·kg-1,阳性组(灌联苯双脂)1.0 g·kg-1,正常组和阴性对照组灌胃等量生理盐水,第7 d给药1 h后除正常组外,各组小鼠腹腔注射0.2%的CCl4橄榄油溶液10 mL·kg-1;第14 d末次给药1 h后除正常组以外,各组小鼠腹腔注射0.2%的CCl4橄榄油溶液10 mL·kg-1,24 h后称重。摘眼球采血,3000 r·min-1离心15min,分离血清测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总蛋白(TP)的含量,同时测定肝组织匀浆中的还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量。从肝的相同部位取肝组织,甲醛固定、包埋、HE染色,进行组织形态学考察。结果超临界CO2萃取的最佳工艺是:温度为45℃,萃取压力为25 MPa,乙醇浓度为70%,时间为1.5 h。用DEAE–52对粗多糖进行分离纯化时,洗脱液为蒸馏水时得到一个明显的多糖峰,质量为0.1342g,得率为28.21%。用0.5mol/L NaHCO3溶液洗脱时,只有明显的多糖和蛋白质的重叠峰,没有多糖单峰。用1.0 mol/L的NaHCO3洗脱时,只有蛋白质峰而无单糖峰。再次利用SephadexG-75做一步纯化。洗脱液为三蒸水,得到一种纯品桔梗多糖,质量为3.8mg,得率为79%。通过单因素实验和正交实验得出了桔梗硒多糖的最佳制备工艺条件;该条件为:反应时间为5 h,超声波频率和温度为60%和60℃,催化剂浓度为6%。桔梗硒多糖的产率是15.66%,硒含量2.282mg/g。急毒实验结果未能测出LD50,其毒性比Na2SeO3的毒性低。对超氧自由基的清除能力的实验结果:桔梗多糖、桔梗硒多糖和Vc的IC50值分别为1.021 mg/mL、0.512mg/mL和0.042mg/mL;对羟基自由基的清除能力的实验结果:桔梗多糖、桔梗硒多糖和Vc的IC50值分别为1.269 mg/mL、0.458 mg/mL和0.596 mg/mL;对DPPH自由基的清除能力的实验结果:桔梗多糖、桔梗硒多糖和Vc的IC50值分别0.312mg/mL、0.230mg/mL和0.156 mg/mL;对总还原能力的测试,在相同的质量浓度下,Vc的还原能力>桔梗硒多糖>桔梗多糖。桔梗多糖、桔梗硒多糖及阿卡波糖最大抑制率分别为70.07%、79.78%和94.21%,其IC50值分别为1.10 mg/mL、0.82 mg/mL和0.41 mg/mL。桔梗多糖为竞争性抑制型,桔梗硒多糖为非竞争性与竞争性抑制混合型。保肝实验结果:桔梗硒多糖对CCl4所致的小鼠的肝损伤,均可以不同程度的降低血清中的ALT(P<0.05)、AST(P<0.05)的水平以及肝组织中的MDA(P<0.05)含量,升高肝组织中的GSH(P<0.05)水平。结论经过超临界CO2辅助提取工艺萃取后,桔梗多糖的产率和含多糖的量明显提高。大大提高了桔梗的利用率,由于该法提取工艺简单,过程省去了化学方法的脱脂脱色,减少了化学药物对多糖的污染;经过对多糖的硒化工艺的研究,证明了此种硒化方法简单易行,硒含量高,毒性小;且桔梗硒多糖的抗氧化性均强于桔梗多糖;硒多糖和多糖对α-糖苷酶的降糖均有抑制作用,且抑制作用桔梗硒多糖强于桔梗多糖;证实桔梗硒多糖对CCl4所致急性肝损伤有保护作用,可以改善CCl4所致的病理组织损伤。为今后的进一步研究提供了理论依据。