【摘 要】
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目的:通过随机临床试验,初步分析牙胶溶解剂对非手术根管再治疗根管预备术后疼痛及短期临床疗效的影响,并探究影响非手术根管再治疗术后疼痛及短期临床预后的因素。方法:收集并分析2019年7月至2020年12月期间在浙江大学医学院附属口腔医院牙体牙髓科就诊的符合纳入标准的51例非手术根管再治疗患牙,随机分入接受机械预备和牙胶溶解剂联合治疗的实验组（N=25）和仅接受机械预备的对照组（N=26）。所有患牙的
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目的:通过随机临床试验,初步分析牙胶溶解剂对非手术根管再治疗根管预备术后疼痛及短期临床疗效的影响,并探究影响非手术根管再治疗术后疼痛及短期临床预后的因素。方法:收集并分析2019年7月至2020年12月期间在浙江大学医学院附属口腔医院牙体牙髓科就诊的符合纳入标准的51例非手术根管再治疗患牙,随机分入接受机械预备和牙胶溶解剂联合治疗的实验组（N=25）和仅接受机械预备的对照组（N=26）。所有患牙的治疗均由1位临床医生依据标准化的非手术根管再治疗程序完成。详细记录患者的基本信息、临床检查结果以及治疗过程,收集影像学资料,指导患者使用数字化疼痛量表记录根管预备术后1-7天的疼痛程度。进一步分析可能影响非手术根管再治疗根管预备术后疼痛和短期临床疗效的因素,比较实验组和对照组术后24小时疼痛发生率、疼痛程度和短期临床疗效有无差异。结果:本研究最终纳入分析了47位患者的51例患牙,平均随访时间6.0±2.94个月。根管预备术后疼痛主要集中于治疗后三天内,术后第一天疼痛的发生率为51.0%,第二天为39.2%,第三天为17.6%。分析发现影响术后疼痛的重要因素是初次根管治疗的根充密度,初次根管治疗根充稀疏的患牙根管预备后第一天疼痛发生率低于根充致密的患牙（OR=0.285,P＜0.05）。短期临床疗效判断为治疗成功的患牙占78.4%,治疗有效的患牙13.7%,治疗失败的患牙7.8%。影响短期临床成功率的因素主要有年龄、性别和有无术中牙胶超出根尖孔。年龄＞35岁的患牙非手术根管再治疗短期成功率低于年龄≤35岁者（OR=0.05,P＜0.05）;女性患者非手术根管再治疗成功率高于男性患者（OR=13.676,P＜0.05）;再治疗术后无牙胶超出根尖孔的患牙临床成功率高于存在牙胶超出根尖孔的患牙（OR=18.792,P＜0.05）。进一步分析牙胶溶解剂对术后疼痛的影响,发现实验组患牙术后24小时疼痛发生率为60%,对照组为42.3%,但无统计学差异（P＞0.05）;实验组术后1-3天疼痛程度均高于对照组,但无统计学差异（P＞0.05）。此外,两组患牙术后的短期临床疗效无显著差异（P＞0.05）。结论:1.初次根管治疗的根充密度可能是影响非手术根管再治疗根管预备术后疼痛的重要因素。2.年龄、性别和有无再治疗术中牙胶超出根尖孔可能是影响非手术根管再治疗短期临床成功率的重要因素。3.牙胶溶解剂存在加重术后疼痛的可能性,对短期临床疗效无影响,临床上应用时应综合考虑其利弊。目的:探究转录因子Klf6在成牙本质细胞分化过程中的作用,并探索其调控成牙本质细胞分化的分子机制。方法:本研究利用免疫组化检测KLF6在小鼠牙胚发育过程中的表达模式。矿化结节染色和碱性磷酸酶染色检测永生化小鼠牙乳头细胞系（immortalized dental papilla mesenchymal cells,i MDP-3）在成牙本质细胞分化诱导后的矿化能力。Real-time RT-PCR和Western blotting检测分化诱导过程中Dspp,Dmp1,Runx2,Alp,Klf6的表达水平。为进一步探究Klf6的功能,在体外通过细胞转染过表达或抑制Klf6表达。Real-time RT-PCR和Western blotting检测成牙分化相关基因的表达,碱性磷酸酶染色和茜素红染色检测细胞矿化能力。MTT实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,并利用Real-time RT-PCR检测过表达或抑制Klf6表达后细胞周期相关基因p21,p27,Cyclin D1（ccnd1）的表达变化。双荧光素酶报告基因检测Klf6对Dspp和Dmp1的转录调控。结果:在牙胚发育过程中,KLF6广谱表达于小鼠牙胚上皮细胞和间充质细胞内,且在前成牙本质细胞内高表达。在i MDP-3细胞向成牙本质细胞分化诱导的过程中,Klf6（P＜0.01）,Dspp（P＜0.05）,Dmp1（P＜0.01）,Runx2（P＜0.01）和Alp（P＜0.01）的表达升高。过表达Klf6促进成牙本质细胞分化,抑制Klf6表达则抑制成牙本质细胞分化。过表达Klf6抑制细胞增殖,阻滞细胞周期,p21（P＜0.001）和p27（P＜0.05）表达增加,ccnd1表达下降（P＜0.05）。抑制Klf6表达可促进细胞增殖、细胞周期,下调p21（P＜0.01）,p27（P＜0.01）的表达,上调ccnd1（P＜0.001）的表达。双荧光素酶报告基因实验显示Klf6可直接结合Dspp和Dmp1启动子上的特定区域,转录激活其表达。结论:Klf6能阻滞成牙本质细胞周期进展,抑制增殖,并促进成牙本质细胞分化。此外,Klf6通过直接结合Dspp和Dmp1启动子上的特定区域,上调其表达,从而促进成牙本质细胞分化。本研究为牙髓损伤修复提供了潜在治疗靶点。
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