甘草酸(Glycyrrhizic Acid,GA)是传统中药甘草的主要活性成分,具有保护肝脏、抗炎症反应以及抗病毒作用等。益生菌是一类对宿主健康有益的细菌制剂。嗜酸乳杆菌(L.acidophilus,L.aci)是一种普遍使用的益生菌,具有增强免疫力,抵抗炎症反应及病毒感染的作用。课题组前期研究发现,口服L.aci能够增强DNA疫苗的免疫力,增加病毒特异性的抗体效价,具有较好的佐剂作用。可见,单独使用GA或L.aci均具有抗炎及免疫调节作用。然而,GA与L.aci联合用药对小鼠肠道菌群的改变及免疫功能的效果目前尚未报道。本研究以Balb/c雄性小鼠为动物模型,采用免疫学、细胞生物学、实时荧光定量PCR及二代测序等技术,研究了 GA和L.aci的协同作用效果。实验主要包括:1)通过GA和L.aci共培养实验,研究GA对L.aci生长的影响;2)检测了GA与L.aci联合用药对调节性T细胞的数量、血清中细胞因子水平、肠道组织细胞因子水平以及对肠道菌群的影响;3)基于正常肠道组织来源的CCC-HIE-2细胞和Caco-2细胞,检测了 GA和L.aci在体外试验中对肠道病毒感染的影响。主要得到以下研究结果:1)GA和L.aci共培养时,通过检测L.aci的菌液浓度(吸光值OD600),初步发现共培养36小时时GA对L.aci的生长具有促进作用,但进一步的结论及作用机理有待后续实验确定。2)GA和L.aci联合用药对正常小鼠免疫水平及肠道菌群的影响,GA和L.aci联合使用能显著提高血液中的调节性T细胞(FoxP3+)的数量,血清细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-17A和IL-10在空白对照组、GA组、L.aci组以及GA联合使用L.aci组之间没有显著性差异,肠道组织中细胞因子MCP-1、IL-1、iNOS、IL-6和IL-10在空白对照组、GA组、L.aci组以及GA联合使用L.aci组之间没有显著性差异。与空白对照组、L.aci组、及GA+L.aci组相比,口服GA能明显增加小鼠肠道菌群的多样性。从门水平的相对丰度图发现,互养菌门在L.aci组所占比例明显比在GA组大,其P值为0.025。3)检测GA和L.aci联合用药的抗病毒作用,基于CCC-HIE-2细胞的体外实验各组的拷贝数之间没有明显差异,基于Caco-2细胞GA对轮状病毒的复制有一定的抑制作用,L.aci对轮状病毒的复制有一定的抑制作用,GA和L.aci联合用药时对轮状病毒的抑制作用比单独用L.aci的效果好。GA联合L.aci具有一定的协同作用,能够增多调节性T细胞数量,改善肠道菌群,提高机体免疫力,同时对肠道病毒的感染具有一定的抑制作用。本研究结果为GA和L.aci在临床上联合使用提供了理论依据和初步的前期实验数据。