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内生真菌是一个新的有待开发的微生物资源。不仅能从传统的药用植物中分离到有益内生真菌,在一些特殊环境下生长的其它植物也发现大量产活性代谢产物内生真菌,内生真菌对提高作物固氮、生物防控等方面起着重要的作用。本课题选择黄帚橐吾为研究对象,对植株的根、茎、叶三种组织的内生真菌进行分离纯化及初步鉴定。选用沙门氏杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌三种病原细菌为供试菌,研究黄帚橐吾内生真菌代谢产物的抑菌活性以及热、PH、紫外光对发酵液抑菌活性稳定性的影响；并对其抑菌活性较好的菌株进行了分子鉴定和发酵条件优化,研究结果如下：1.通过组织分离法,采用MEA和察氏3种分离培养基,共分离纯化得到黄帚橐吾内生真菌67株,从分布情况来看,根部分离最多为36株,茎、叶分别得到19株和12株,经典形态学分类方法进行初步鉴定,它们分属于5目5科9属,其中木霉属和镰孢属为优势菌属。2.对18株代表菌株发酵产物抑菌活性筛选研究发现,有14株菌对至少一种供试细菌具有抑菌活性(抑菌圈>8mm),占总数的77.78%。其中,27.78%对E.coli具有较好抑菌活性(抑菌圈>12mm),16.67%对Salmonella具有较好抑菌活性,44.44%对S.aureus具有较好抑菌活性。对抑菌活性最好的菌株N2进行形态学和分子鉴定确定其分类地位,为半知菌门、丝孢目、丛梗孢科、木霉属、棘孢木霉,最终定名为Trichoderma asperellum LB-N2 (Accession No:KM207842)。3.黄帚橐吾内生真菌N2发酵液稳定性结果显示：抑菌活性成分热稳定性一般,60℃以下具有较好的稳定性,在中性偏弱酸环境稳定性最佳,紫外光照对发酵液影响较小,不同时间紫外光照下发酵液活性基本保持一致。4.对碳源和氮源的选择上,黄帚橐吾内生真菌N2对小分子类碳源和有机氮源的利用率最高,在此培养基中生长最快。5.对黄帚橐吾内生真菌N2发酵液使用石油醚、正丁醇、乙酸乙酯三种不同极性试剂萃取,研究结果表明,N2发酵液不同萃取相对指示菌的抑菌活性大小差异显著,乙酸乙酯相抑菌活性最佳,石油醚萃取相无抑菌活性。说明活性物质属强极性物质,主要集中于乙酸乙酯中。6.将菌株N2发酵液乙酸乙酯萃取相浓缩为浸膏,进行硅胶柱层析初步分离和抑菌活性跟踪试验,分离到2个较高活性组分用于进一步分离纯化,薄层层析结果显示为单一的褐色斑点,物质类型初步定性鉴定为生物碱和萜类物质。