目的基于前期对鳖甲肽HGRFG药效学的初步研究,研究不同给药方式对CCl4诱导的肝纤维化大鼠治疗效果的影响;考察鳖甲肽HGRFG是否通过抑制大鼠原代肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）中TGF-β/Smad信号通路中信号转导抑制大鼠原代HSC活化,从而抑制其分泌细胞外基质。方法1.采用腹腔注射四氯化碳橄榄油溶液（CCl4:Oil=4:6）建立SD大鼠肝纤维化模型,随机分为正常组、模型组、IFN-γ组、HGRFG（IM）组、HGRFG（IV）组、联合用药组（Union）,每组10只大鼠,各组采用对应的给药方式,连续给药8周。测定血清生化指标评价肝功能;称量大鼠体重及肝重,计算肝脏指数;测定肝脏组织超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）以及羟脯氨酸（hydroxyproline,Hpy）水平以评价肝损伤程度;进行肝组织HE染色观察大鼠肝组织的病理变化。2.采用TGFβ1诱导大鼠原代HSC活化,研究鳖甲肽HGRFG是否通过抑制TGF-β/Smad信号通路中信号转导从而抑制大鼠原代HSC活化并抑制其分泌细胞外基质,并考察鳖甲肽HGRFG对大鼠原代HSC细胞中α-SMA、TGFBR1、CD105、COLⅠ、COLIII m RNA含量,α-SMA、TβR1、COLⅠ、COLIII、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达的影响。结果1.CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中,大鼠体重减轻,毛色暗淡,肝脏指数增加,病理切片中肝小叶结构异常,出现不同程度的纤维样病变,并形成假小叶;肝纤维化模型大鼠血清中,丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、透明质酸（LN）、III型前胶原（PCⅢ）、纤连蛋白（HA）含量明显升高;肝组织中SOD活力值显著降低,MDA、Hyp含量显著升高。尾静脉注射鳖甲肽HGRFG后,模型大鼠血清标准物显著下调,MDA、Hyp含量显著降低。2.鳖甲肽HGRFG干预TGFβ1活化的大鼠原代HSC后,α-SMA、COLⅠ、COLIII m RNA的含量升高,TGFBR1、CD105 m RNA的含量显著降低。低剂量组细胞外Ⅰ型胶原含量无明显变化,Ⅲ型胶原含量显著升高,细胞内TGFBR1、CD105、COLIII m RNA含量显著降低,SMAD2、SMAD3、COLⅠm RNA无明显变化;高剂量组,细胞外Ⅰ型胶原含量显著降低,Ⅲ型胶原含量无明显变化,细胞内α-SMA、TGFBR1m RNA含量显著降低,CD105、SMAD2、SMAD3、COLⅠ、COLIII m RNA含量无明显变化。低剂量和高剂量组中,细胞内Smad2/3蛋白、p-Smad2/3蛋白表达均显著降低,低剂量组中TβRⅠ蛋白表达显著下调,高剂量组中α-SMA、TβRⅠ蛋白表达均显著下调。结论结合前期鳖甲肽HGRFG研究结果,研究不同给药方式对鳖甲肽HGRFG药效的影响,鳖甲题HGRFG尾静脉给药能显著缓解大鼠肝脏纤维化病变,并改善大鼠肝功能,具有较好的抗肝纤维化作用;在通路研究结果中证实,抑制剂SB431542通过抑制TGF-βⅠ型受体,阻断TGF-β/Smad信号通路中信号传导,从而抑制大鼠原代HSC活化。鳖甲肽HGRFG抑制大鼠原代HSC活化作用较弱,可能是通过调控TGFβ与非经典Smad通路而达到抑制原代HSC活化,从而表现出较弱的抑制活性;2m M HGRFG可抑制大鼠原代HSC活化,显著降低细胞外基质中Ⅰ型胶原含量,下调Smad2/3、p-Smad2/3蛋白的表达。