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目的研究Th9细胞在乙型病毒性肝炎肝硬化患者中的表达和作用,研究Th9细胞在乙型病毒性肝炎肝硬化患者中的表型以及CCL20/CCR6趋化轴对Th9细胞可能影响,探讨它们是否参与肝纤维化的发病机制。方法收集30例乙型病毒性肝炎肝硬化患者和10例健康捐献者的外周血,收集18例乙型病毒性肝炎肝硬化肝组织和6例正常的肝组织。流式细胞术检测外周血中IL-9+IL-22-CD4+T(Th9)细胞的比例以及Th9细胞的表型;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-9和CCL20的水平;肝组织石蜡切片免疫组化检测趋化因子CCL20和其受体CCR6以及a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin, a-SMA)的表达。分析Th9细胞、IL-9及CCL20/CCR6趋化轴与肝纤维化的相关性。结果(1)流式细胞术检测显示:乙型病毒性肝炎肝硬化组外周血Th9细胞的比例(3.55%±1.69%)较正常对照组(0.97%±0.24%)明显升高。乙型病毒性肝炎肝硬化组Th9细胞中CCR4+Th9细胞,CCR6+Th9细胞的比例较正常对照组显著升高(分别是85.8%±12.5% vs.56.4%±2.36%;78.1%±10.6% vs.56.4%±9.04%),差异均有统计学意义(P均<0.05)。(2)酶联免疫吸附试验检测结果显示:乙型病毒性肝炎肝硬化组血清IL-9和CCL20的水平较正常对照组显著升高(分别为:25.55±4.62vs.16.18±1.32pg/ml; 224.77±33.73 vs.34.58±3.72 pg/ml),差异均有统计学意义(P均<0.05)。(3)免疫组织化学染色分析结果显示:CCR6表达在汇管区中浸润的淋巴细胞的细胞膜,CCL20表达在汇管区树突状细胞、肝星状细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞和胆管上皮细胞的细胞膜和细胞质。与正常对照组相比,乙型病毒性肝炎肝硬化组CCR6和CCL20表达均显著增高(0.027±0.021 vs.0.006±0.001,0.033±0.011 vs.0.017±0.006,均P<0.05)。此外,与对照组相比,肝硬化组α-SMA表达明显增加(0.054±0.018 vs.0.007±0.001,P<0.05)。(4)乙型病毒性肝炎肝硬化组Th9细胞的比例与凝血酶原时间和总胆红素水平呈正相关性(r值分别为0.725,0.617),差异均有统计学意义(P均<0.05);α-SMA和CCR6、CL20表达呈正相关(r=0.492、0.516,均P<0.05);血清中IL-9的水平与CCL20水平呈正相关性(r值为0.47,P<0.05)。结论(1)Th9细胞和IL-9可能参与乙型病毒性肝炎肝硬化的发病机制,(2)在乙型病毒性肝炎肝硬化微环境中Th9细胞高表达CCR4和CCR6;(3) CCL20/CCR6趋化轴可能在Th9细胞募集的过程中发挥作用。