论文部分内容阅读
前期研究表明AtcpSecA基因的突变使叶绿体发育缺陷，内部缺少正常类囊体片层结构，叶片呈黄白色。为进一步研究该基因的功能，构建了35S：:AtcpSecA的植物双元表达载体。采用农杆菌介导方法，将35S：:AtcpSecA构建分别转化seca-2突变体和野生型拟南芥。功能互补验证了前期获得的具有黄白表型的拟南芥突变体的确是由AtcpSecA基因被破坏后导致的。
本文研究了AtcpSecA基因的表达特异性。构建了AtcpSecA基因启动子与报告基因GUS的融合基因AtcpSecA:：GUS，采用农杆菌介导方法转化获得AtcpSecA::GUS转基因拟南芥。GUS组织化学染色结果表明，在AtcpSecA::GUS转基因拟南芥的下胚轴、子叶、叶片、果柄等绿色组织中有很强的GUS活性，而在根、花序和种荚等非绿色组织中几乎没有GUS活性。降低培养基中琼脂浓度，转基因拟南芥中AtcpSecA:：GUS基因的表达明显受到抑制，黑暗处理基因的表达则显著受到促进。外源施加细胞分裂素、脱落酸、赤霉素、油菜素内酯以及茉莉酸后，AtcpSecA:：GUS转基因拟南芥中的GUS基因的表达明显受到抑制；外源施加水杨酸和乙烯后，GUS基因的表达受促进；而生长素处理后，GUS基因的表达变化不明显。对35S：：AtcpSecA转基因拟南芥的表型分析发现，转基因拟南芥的生长较之野生型更加旺盛，抽薹、开花和结种荚均提早，分枝较之野生型更多，衰老延缓。弱光及黑暗处理后发现转基因拟南芥长势较之野生型更好。