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目的:化学治疗在恶性肿瘤的综合治疗中占有重要地位,近年来,新的细胞毒性药物的发展使包括实体瘤在内的许多肿瘤治疗有了明显改观,尽管如此,肿瘤细胞对多种化疗产生多药耐药(multidrug resistance, MDR)仍是造成化疗失败的主要原因,MDR 是指恶性肿瘤在接触一种化疗药物后,除了对这种药物产生耐药以外,还对其他结构及作用机制与之不同的化疗药物产生了交叉耐药的现象,是恶性肿瘤对抗化疗药物的重要细胞防御机制。人口腔表皮样癌(human oral epidermoid carcinoma)耐长春新碱(vincristine, VCR)的KBv200 细胞是张晓红等于1994 年用对长春新碱敏感的KB 细胞为亲本,通过诱变剂甲基磺酸乙酯刺激,然后在培养液中加入浓度递增的VCR,经过半年时间的诱导而得到的耐药细胞株,除了对长春新碱耐药以外,还对其他抗肿瘤药物如紫杉醇、阿霉素、秋水仙碱等也有不同程度的交叉耐药,即产生了MDR。KBv200 细胞耐药的机制可能是由于mdr1 基因表达增加,产生过量的P-糖蛋白(P-gp),使药物外排增多所致,但是MDR 形成的机制非常复杂,任何单一的耐药机制均难以圆满解释这一现象,Matsumoto 等用克隆选择的方法,表明肿瘤细胞产生MDR 是一个动态过程,可以有多种机制参与。细胞凋亡(apoptosis),也称为细胞程序性死亡(programmed cell death, PCD) ,是细胞在其一系列内源性基因的调控下,发生自然或生理性死亡的过程。随着对细胞凋亡研究的深入,已经发现,肿瘤耐药性的形成与细胞凋亡的障碍也有着密切的关系,所以凋亡抑制或许比其他机制更具有普遍性。因此,本研究以KB 及KBv200 细胞为实验材料,在充分分析KBv200 细胞耐药特性的基础上,采用Hoechst 33258 荧光染色法及琼脂糖DNA 电泳法观察VCR 对两种细胞的凋亡诱导作用,分析凋亡机制在MDR 产生中的作用;采用免疫细胞化学及原位杂交(in situ hybridyzation,