甘蓝型油菜PO/CMS育性恢复基因图谱定位及抗菌核病恢复系的分子标记辅助选择

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该研究的目的就是对生产上大面积应用的polCMS的育性恢复基因(Rfp)进行图谱定位,并在此基础上标记辅助选育抗菌核病的恢复系.获得的主要结果如下:1、构建了[(1141Ax恢5200)x1141B]BC<,1>F<,1>作图群体,育性调查表明可育株:不育株为72:66,卡平方检验符合1:1的分离比,证实了polCMS育性恢复受一对显性基因控制.2、采用分离群体集团混合分析法(BSA)法筛选了1040个10-mer的随机引物,找到了与Rfp连锁的2个RAPD标记S1019.720和S1036.810,它们位于Rfp的一侧,遗传图距分别为5.8cM和12.3cM.3、把上述2个RAPD标记片段回收、克隆和测序,设计引物后转化成了较稳定的易在育种中应用的SCAR标记(SCS1019.720和SCS1036.745).4、在92个拟南芥ESTs克隆和120个油菜核探针中,找到了3个与Rfp连锁的RFLP标记,它们分布于Rfp的两侧,较近的一个RFLP标记(ec3b4.3200)距Rfp18.0cM.根据这些探针所在的连锁群,初步把Rfp定位在Ferreira等(1994)的第5连锁群的顶端.5、构建了包含279个单株的[(恢5200x宁RS-1)x恢5200]BC<,1>F<,1>抗感分离群体.苗期离体叶接种鉴定结果表明,群体内单株病斑直径大小呈连续性分布,说明油菜的抗菌核病性为数量性状.6、运用田间接种及与抗菌核病基因连锁的2个SCAR标记对BC<,1>F<,1>群体中的抗病植株进行了选择,结合各个单株的长势长相,从中选出27个生长健壮的抗病植株.7、运用田间接种和与抗菌核病基因连锁的6个RAPD标记对BC<,1>F<,1>群体中的植株进行了抗病性选择,从393株中选出了30个苗期抗性较好的单株.8、在3个单株产生的株系中,有一个株系测交群体无育性分离.于是对该株系的自交群体中的108个单株进行苗期和成株期的抗性鉴定,选出了2个抗性最好的单株RSH1和RSH2,培育出抗菌核病的polCMS新恢复株.9、对实施背景选择的RAPD、RFLP和AFLP标记进行了比较,认为AFLP标记是一种理想的辅助背景选择的分子标记.最后,对本实验涉及到的背景选择的一些问题进行了探讨.
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