急性呼吸道感染患儿呼吸道病毒分子流行病学和临床特征的研究

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研究背景:呼吸道合胞病毒(RSV)和腺病毒(AdV)是儿童呼吸道感染的最重要的病原。RSV是引起每年呼吸道感染流行的首要病原,AdV不仅是儿童呼吸道感染的一个常见病原,而且和严重重症肺炎,慢性肺部的后遗症有关,世界各地都有AdV爆发流行的报道。这两种病毒造成很大的疾病负担。但关于RSV和AdV的分子流行病学特点、临床特征的资料很少,而RSV各亚型与临床疾病严重程度相关性的研究在中国尚未见报道。研究目的:调查兰州地区呼吸道感染患儿中RSV和AdV的分子流行病学特点,流行模式以及各亚型和疾病严重程度的相关性。对象及方法:第一部分:(1).收集兰州地区2006,11-2009,3在兰州大学第一医院就诊的14岁以下急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物标本894份。(2).用RT-PCR的方法扩增RSV N基因,并对227例阳性标本扩增G基因3’末端的第二高变区(HVR2),扩增产物进行序列分析。(3).对RSV病毒的分子流行特征及临床特点进行析。第二部分:(1)收集兰州地区2006,11-2009,11在兰州大学第一医院就诊的14岁以下急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物标本1169份。(2)PCR的方法扩增AdV Hexon基因,扩增产物进行序列分析。(3)对AdV病毒的分子流行特征及临床特点进行分析结果:894份呼吸道鼻咽分泌物标本中共检出341份RSV阳性标本,检出率38.14%,年龄最小1天,最大144月,只有4.4%(15/341)的患儿年龄大于5岁,男女比例1.9:1。HRSV感染高峰多在冬春季。我们随机选取227例扩增G基因HVR2进行亚型鉴定,扩增结果测序并分析,基因进化树分析结果显示,227例RSV阳性株有60%为GA2型,34.4%为GBA型,4.8%为GB2,0.4%为GB3。新发现的带有60bp复制片段的GBA型成为2008~2009季的主要流行株。氨基酸序列及糖基化位点分析发现我们检测出的RSV兰州株高度变异,所有的变异都是替换,没有缺失、插入以及移码突变。除了GBA型更容易在下呼吸道中检测出以外,GA2, GBA亚型在流行病学特征及疾病的严重程度上没有统计学差异。2006年~2009年共1169份呼吸道感染患儿鼻咽分泌物标本中检测到AdV阳性标本74份,检出率为6.33%。在74份阳性标本中,绝大多数为AdV3型(58例),接下来是AdVll型(10/74),AdV2型(2/74), AdV 7(2/69), AdV 6(1/74), andAdV 1(1/74),在各个季节均有AdV的检出。AdV的高发年龄是3-7岁的儿童,但是在小于6月的婴儿中也有相对较高的比例(3.293%)。AdV感染儿童最常见的诊断是上呼吸道感染,最常见的症状为发热和咳嗽。结论:HRSV是儿童急性呼吸道感染最重要的病毒病原,我们发现在2006-2009年兰州地区有4个亚型(i.e., GA2, GBA, GB2, and GB3)流行,主要的流行株随着流行季的变化交替流行,B亚型比A亚型变异程度更高,而疾病的严重程度和亚型(GA2,GBA)没有相关性。2006-2009年,多种AdV血清型在兰州地区流行,AdV3是主导流行株,而近年来很少在呼吸道感染报道的AdV11也在兰州地区出现,并在AdV感染中占有很高的比例(10/74)。兰州地区AdV的流行没有季节特征。
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