【摘 要】
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目的：比较观察龟鹿二仙胶拆方中龟甲胶、鹿角胶含药血清对豚鼠关节软骨细胞的增殖及MEKl/2和ERK1/2表达的影响,进一步明确龟甲胶、鹿角胶对骨关节炎的防治作用,为探讨补肝肾中
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目的：比较观察龟鹿二仙胶拆方中龟甲胶、鹿角胶含药血清对豚鼠关节软骨细胞的增殖及MEKl/2和ERK1/2表达的影响,进一步明确龟甲胶、鹿角胶对骨关节炎的防治作用,为探讨补肝肾中药促进软骨细胞增殖及防治骨关节炎提供新依据。方法：1.将48只Wistar大鼠随机分为4组(龟甲胶组、鹿角胶组、盐酸氨基葡萄糖组和对照组,分别计为G组、L组、A组和K组),并分别连续灌胃7天后,采血制备含药血清。2.对三月龄豚鼠膝关节关节软骨细胞分离、培养及鉴定,并建立体外培养体系。3.MTT比色法观察5%含药血清对各组豚鼠F2代软骨细胞增殖的影响。4. ELISA检测MEK1/2、ERK1/2的表达。5.荧光定量PCR测定软骨细胞MEK1/2、ERK1/2mRNA的含量。结果：1.Ⅱ型胶原免疫组化染色和甲苯胺蓝染色均为阳性,提示成功建立豚鼠软骨细胞体外培养体系。2.MTT比色法结果：龟甲胶、鹿角胶和盐酸氮基葡萄糖含药血清对软骨细胞均有促增殖作用,G组>L组>A组>K组,(P<0.05)。3. ELISA法结果：龟甲胶、鹿角胶和盐酸氨基葡萄糖含药血清均能有效促进MEK1/2、ERK1/2的表达,其促表达效果均为G组>L组>A组>K组,(P<0.05)。4.荧光定量PCR结果：龟甲胶、鹿角胶和盐酸氨基葡萄糖含药血清均能显著上调MEK1/2、ERK1/2基因的表达,且G组>L组>A组>K组,(P<0.05)。结论：龟甲胶和鹿角胶均可上调豚鼠关节软骨细胞MEK1/2和ERK1/2的表达水平,促进OA软骨细胞的增殖,且滋肾阴的龟甲胶作用强于补肾阳的鹿角胶。
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